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基因工程
名词解释:
基因工程:重组DNA技术或者基因转移技术,在体外将核酸分子插入病毒、质粒或其他载体分子,构成遗传物质的新组合,并使之渗入到原先没有这类分子的宿主细胞内,而能持续稳定的传递和表达。
报告基因:其编码产物能够被快速测定,常用来判断外源基因是否成功地导入受体细胞(器官或组织)并检测其表达活性的一类特殊用途的基因。
双元载体:由两个分别含有T—DNA和Vir区的相容性突变Ti质粒构成的双质粒载体系统。
受体系统:用于转化的外植体通过组织培养途径或其他非组织培养途径,能高效、稳定地再生无性系,并能接受外源基因的整合,对转化选择抗生素敏感的再生系统。
正负选择法:哺乳动物细胞转染DNA发生随机整合的几率相当高,而同源重组的频率则相当低。正是由于这种缘故,给哺乳动物细胞的基因定向插入事件的检测造成了很大困难。用于富集同源重组事件的特殊试验体系,涉及正选择和负选择两个方面。
基因靶标:通过在转染细胞中发生的外源基因与核基因组目标基因之间的DNA同源重组,使外源基因定点地整合到核基因组的特定位置上,从而达到改变系把你遗传特性的目的。
密码子使用的偏爱性:无论是真核基因还是原核基因,一种特定的氨基酸并不是以同等频率使用所有的同义密码子,而主要使用其中的某一两种。这种密码子使用的非随机性现象
选择标记基因:用于鉴别目标DNA的存在,将成功转化了质粒的宿主挑选出来的基因。主要是一类编码可使抗生素或除草剂失活的蛋白酶基因。
HAT选择法:由于选择TK+细胞的培养基含有次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸苷,所以称之为。
生殖细胞浸泡法:将供试外植体如种子、胚、胚珠、子房、花粉粒、幼穗悬浮细胞培养物等直接浸泡在外源DNA溶液中,利用渗透作用把外源基因导入受体细胞并稳定地整合、表达和遗传。
胚囊、子房注射法:使用微量注射器把外源DNA溶液注射到子房或胚囊中,由于卵细胞的吸收使外源DNA进入受精的卵细胞中,从而获得转基因的种子。
启动子:RNA聚合酶识别并结合,从而起始转录的一段特异DNA序列。
增强子:增强与之相连锁的基因转录活性的调控序列。
先导序列:从真核基因mRNA5’端帽子到起始密码子之间不翻译的核苷酸序列。
胸苷激酶TK:核苷酸合成代谢途径中的一种酶,能够将胸苷转换为胸苷一磷酸。
In Planta转化:利用花粉粒及花粉管通道、子房、幼穗及种胚导入外源基因。
花粉管通道介导基因转化:授粉后,外源DNA能沿花粉管渗入,经过诛心通道进入胚囊,转化尚不具备正常细胞壁的卵、合子或早期胚胎细胞。
愈伤组织再生体系:外植体经脱分化培养诱导愈伤组织,并通过分化培养能获得再生植株的受体系统。
直接分化再生系统:外植体细胞越过脱分化阶段而直接分化出不定芽获得再生植株。用叶片、幼茎、子叶、胚轴等外植体,直接出芽。
胚状体再生系统:二倍体或单倍体细胞在未经性细胞融合的情况下,模拟有性合子胚胎发生的各个阶段而发育形成一个新的个体的形态发生过程。
生殖细胞受体系统:以生殖细胞如花粉粒、卵细胞为受体细胞进行基因转化的系统。种质系统。
基因枪法,微弹轰击法:将外源DNA包被在微小的金粒或钨粒表面,然后在高压的作用下微粒被高速射入受体细胞或组织。微粒上的外源DNA进入细胞后,整合到植物染色体上,得到表达,从而实现基因的转化。
种质系:合子胚中特定细胞将来分化发育成植物体的特定器官和部位。
原生质体的基因转化:以原生质体为受体的基因转化。PEG法、脂质体法、电激法、超声波法、激光打孔法等。
脂质体法:用脂类化学物质包裹DNA成球体,通过植物原生质体的吞噬或融合作用把内含物转入受体细胞。
脂质体:是人工构建的由磷脂酰胆碱或磷脂酰丝氨酸等组成的双层膜囊。
电激法介导的基因转化:利用高压电脉冲作用,在原生质体膜上电激穿孔形成可逆的瞬间通道,从而促进外源DNA的导入。
显微注射介导基因的转化:利用显微注射仪将外源DNA直接注入受体的细胞质或细胞核中。
激光微束介导的基因转化:将激光引入光学显微镜聚集成微米级的微束照射培养细胞后,在细胞膜上可形成能自我愈合的小孔,使加入细胞悬浮液里的外源DNA流入细胞,实现基因的转移。
生物反应器:用于生物反应过程的容器总称。包括酶反应器(游离酶和固定酶)、固定细胞反应器、各种细胞培养器、发酵罐和转基因动植物等。
Bradford法:考马斯亮蓝与蛋白质结合产生蓝色,595nm处有最大吸收值。
基因水平转移HGT:遗传物质从一个有机体向另一个与供体有性不亲和的有机体转移
酵母双杂交系统:将待研究的两种蛋白质的基因分别克隆到酵母表达质粒的转录激活因子的DNA结合结构域基因和GAL4激活结构域基因,构建成融合表达载体,从表达产物分析两种蛋白质相互作用的系统。
物理图谱:表示某些基因与遗传标志之间在基因组上的直线相对位置和距离的图谱。
遗传图谱:由基因重组
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