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柱的尺寸和吸附剂量 某些典型样品量适用的柱尺寸和吸附剂数量 样品量 吸附剂量 柱直径 柱高 0.01g 0.3g 3.5mm 30mm 0.1g 3g 7.5mm 60mm 1.00g 30g 16.0mm 130mm 10.00g 300.0g 35.0mm 280mm Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. D 流速 溶剂流经柱子的速率对於决定一个分离能进行得多好也起着作用. 一般来说, 需待分离的化合物在柱上逗留愈久, 其在固定相和移动相之间的平衡愈广泛. 结果可以使较为相似的化合物得到分离. 然而如果流速过慢, 则混合物中各个物质到了溶剂中后其在溶剂中的扩散速率可能变得大於这些物质沿柱下行速率. 在这种情况下谱带变宽, 反而使分离效果变差. 事实上, 在溶剂极性相同的情况下, 溶剂的流速一般而言(HPLC,MPLC除外),流速均以越快越好,因为一般而言流动相流速与板高成反比,而板高越小越好,所以流动相流速越快越好。所以快速 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 流速 (加压)柱层析的效果比一般重力柱层析好。 Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 装柱 柱层析法中最关键性的操作是装柱. 柱子在用吸附剂填充时必须装得非常均匀, 如果装得不整齐, 出现气泡, 缝隙等会明显影响分离效率. 主要存在两种情况: 一: 谱带的最前面的边缘或称前沿不水平, 如果两条谱带紧靠在一起而又无水平的谱带前沿, 那么要想收集每一条谱带而把另外一条谱带完全排除在外是不可能的! 造成这个问题的因素有两个: 1. 吸附剂填充料的顶面不呈水平. 2. 柱子未被夹持在两个平面中(即前-后, 左-右两个平面) 完全垂直的位置. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 装柱 二: 谱带前沿的一部分从谱带的主体部分中间向前伸出, 此时发生的现象称为流动或称沟流. 造成这种现象的原因主要是吸附剂表面不平整或在填料中有任何不平整性或气泡. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd. 装柱 A 湿法(浆液法) 即吸附剂以浆液状态被装入管内. 浆液是一种溶剂和一种不溶解的固体的混合物. 操作方法是将固体吸附剂慢慢加入盛有大量溶剂的容器中. 注意要严格遵
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