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- 2017-01-22 发布于湖北
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膜片钳与LTP
膜片钳与LTP 天津中医药大学第二附属医院 王凯 2014.5 来源和机理 细胞膜由脂质双分子层和蛋白质组成,蛋白质又包括整合蛋白和表面蛋白。 离子通道是一种特殊的膜蛋白,它横跨整个膜结构。 带电离子在膜内外的不同分布态势和在不同状态下的动态变化是可兴奋细胞静息电位和动作电位的基础。这些无机离子通过离子通道的进出所产生的电活动是生命活动的基础。 细胞膜的结构和离子通道 1.结构研究:分子生物学方法确定蛋白质序列;X光绕射方法确定其三维立体结构。 2.功能研究:电生理测定通过离子通道的电流或测量细胞膜电流或膜电位的变化,反映离子通道个体或群体的分子活动。 3.结构和功能相结合:利用基因突变技术在一级结构的特定部位删除、添加或改变残基的序列,然后检测突变后的功能改变。 如何研究离子通道 美国的两位科学家 彼得·阿格雷 罗德里克·麦金农 利用X光绕射方法得到了K离子通道的三维结构,二位因此获得2003年诺贝尔化学奖。 结构研究 采用记录离子通道电流来间接反映离子通道功能,目前有如下两种技术 电压钳(Voltage clamp)技术 膜片钳(patch clamp)技术 离子通道功能观察 20世纪初由Cole发明,Hodgkin和Huxley完善,目的是为了证明动作电位的峰电位是由于膜对钠的通透性发生了一过性的增大过程。但当时没有直接测定膜通透性的方法,于是就用膜对某种离子的电导来代表该
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