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【2017年整理】消化道寄生虫的病原检查
消化道寄生虫的病原检查
① 保证粪便新鲜,送检时间一般不超过24小时,尤其对原虫滋养体检查,必须在粪便排出后半小时内进行,或暂时保存在35℃~37℃ 条件下待查;
② 盛粪便的容器须干燥、洁净,无尿液或水混入,以及无药物、泥土和杂质污染;
③ 容器外贴有标签,注明受检者姓名和受检目的等;
④ 受检粪量一般为5~10g (约姆指末节大小),若要求作粪便自然沉淀或血吸虫毛蚴孵化, 受检粪量一般不少于30g,检查蠕虫成虫或绦虫节片则留检一日内全部粪量;
⑤ 要严格按照粪检程序进行操作,特别是镜检时要熟悉各病原体形态特点并遵顺序观察的原则,以免漏检。人体常见寄生虫的形态特征及鉴别见下表。
人体常见寄生虫卵的鉴别
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蠕虫卵与异物的区别
粪便直接涂片法检查消化道寄生虫
3 张,可提高检出率。
1.检查蠕虫卵
在洁净的载玻片中央,滴一滴生理盐水,用竹签或牙签挑取米粒大小的粪便,置于生理盐水中均匀涂抹。其厚度以载玻片置于报纸上,能透过粪膜隐约辨认玻片下的字迹为宜。一般在低倍镜下检查,如发现可疑虫卵转用高倍镜观察时,需加盖玻片,以免污染镜头。镜检时光线要适当,过强的亮度会影响观察效果。应注意虫卵与粪便中的异物区别,可依据虫卵的形状、大小、颜色、卵壳(包括卵盖等) 和内含物等特征加以鉴别。由于雌性蛔虫产卵量较大,该法特别适用于检查蛔虫卵,涂片1张的检出率约为85%,涂片3张的检出率可达90%~95%。
2.检查原虫
可根据原虫不同的排离阶段,采用不同的方法。
(1)活滋养体检查:方法同检查蠕虫卵,但涂片要薄而均匀。要求粪便新鲜,不能混入尿液和水。若为检查溶组织内阿米巴,对其粘液血便标本,要取粘液部分。在气温较低时,要注意保温,必要时可用保温台保持温度,或先将载玻片和生理盐水略加温,为使滋养体保持活动状态,便于观察。
(2)包囊碘液染色检查:以碘液代替生理盐水滴加于载玻片上,挑取米粒大小的粪便置于碘液中,调匀涂片,加盖玻片。若需同时检查滋养体,可在玻片的另一侧滴一滴生理盐水,同上法涂抹粪便标本,再加盖玻片。这样可使一侧查活滋养体,而加碘液的另一侧查包囊。染色后的包囊呈黄色或棕黄色,糖原泡为棕红色,囊壁、核仁和拟染色体均不着色。
碘液配方:碘化钾4g ,溶于100 ml 蒸馏水中,再加入碘2g ,溶解后贮于棕色瓶中即可使用
厚涂片透明法检查消化道寄生虫
modifieD Kato’s thick smear),适用于检查蠕虫卵。用大小约4cm×4cm的100目/英寸的尼龙网覆盖在粪便标本上,用塑料刮片在网上刮取粪便约50mg,置于载玻片上,用浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸片覆于粪便上,以胶塞轻压使粪便展开约20mm×25mm大小模块。置于30℃~36℃温箱中约30分钟,或25℃约1 小时,待粪膜稍干并透明即可镜检。
本法要注意掌握粪膜的合适厚度和透明时间,若粪膜过厚,透明时间短,虫卵难以发现;若透明时间过长,虫卵则变形,也不易辨认。如检查钩虫卵时,透明时间一般不要超过30 分钟。
玻璃纸制备:将玻璃纸剪成大小约22 mm×30 mm 的小片,浸于甘油-孔雀绿溶液(含纯甘油100 ml,水100 ml 和3%孔雀绿1 ml)中,浸泡24小时以上,直至玻璃纸呈现绿色
定量透明法检查粪便虫卵及计数
Worm burden),也可判断药物驱虫效果。此法系在厚涂片透明法的基础上,定量刮取粪便,并检出粪内全部虫卵予以计数。应用改良聚苯乙烯作定量板,大小为40 mm×30 mm×1.37 mm,模孔为一长圆孔,孔径为8 mm×4 mm,两端呈半圆形,孔内平均可容纳粪样41.7 mg。操作时将定量板置于载玻片上,用手指压住定量板的两端,自筛网上刮取的粪便填满模孔,刮去多余的粪便。掀起定量板, 载玻片上留下一长条形的粪样。将浸透甘油-孔雀绿溶液的玻璃纸(5cm×2.5cm) 覆盖在粪样上,用胶塞轻轻加压,使粪样展平铺成一长椭圆形, 在25℃ 经1 小时后即可镜检,顺序观察并记录粪样中的全部虫卵数。将虫卵数乘以24,再乘以粪便性状系数(成形便1,半成形便1.5,软湿便2,粥样便3,水泻便4),即为每克粪便虫卵数(eggs per gram,EPG)。并根据排便量和常见蠕虫的每条雌虫每天的排卵数(见下表) 计算出虫荷。其他注意事项同厚涂片透明法。
常见蠕虫每条雌虫每日排卵数估计
饱和盐水浮聚法(brinefloatation)检查线虫卵
蠕虫卵及原虫包囊的比重
用竹签挑取黄豆大小(约1g) 粪便置于盛有少量饱和盐水浮聚瓶内(高3.5 mm,直径2cm的圆筒形小瓶),也可用青霉素小瓶代替, 将粪便充分捣碎并与盐水搅匀后,加饱和盐水至瓶口,用竹签挑取浮于水面的粪渣,再慢慢加饱和盐水至稍高于瓶口而不溢出为止。在瓶口轻轻覆盖一载玻片,
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