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植物显微技术课程教案
学时学分:48学时,2.5学分
课程性质:D2,专业选修课
班 级:2002.10-12,生物技术2000,44人(选课),两个实验班
2003.10-12,生物技术2001,51人(选课),两个实验班
2004.8-10,生物技术2002,43人(选课),两个实验班
课程内容:讲解植物显微技术的原理和方法,并最终使学生掌握植物石蜡制片的方法及其各个环节的原理和技术要点
课程安排:上课约5次, 10个学时,学习植物显微技术的基本原理。其余时间分为9次实验,系统学习植物石蜡制片技术,在实验中熟悉、巩固和扩展植物制片的基本理论和技能。所以本课程是以实验为主的课程。
实验分组:实验中每两个同学组成为一个实验小组。每个实验小组从取材料开始,完成石蜡制片的全过程。各个实验小组所用的实验材料互不相同。
实验中有些环节需要几个实验小组的同学相互配合,形成实验大组。如脱水、透明、浸蜡、包埋等环节是全天连续而不能间断的过程,需要几个实验小组的同学轮流替换,才能完成。
实验要求:要求每个小组独立制作的、合格的石蜡制片不少于20片。以小组为单位认真写出实验报告。
成绩评定:学生成绩由三个部分构成
(1)上课及参加实验的考勤(占30%)
(2)合格制片的数量及质量(占50%)
(3)试验报告写作的认真程度,及其对实验过程中问题分析的情况(占20%)
参考教材:生物学显微技术. 余炳生 张仪 北京农业大学出版社,1989
植物组织制片学. 李正理. 北京大学出版社,1996
生物显微技术. 郑国昌 人民教育出版社,1978
讲课内容和学时安排:
讲课内容 学时 第一章 一、生物制片的目的 0.5 二、生物制片的类型 1.5 第二章 第一节 石蜡切片的应用范围 0.5 第二节3.5 第三章 第一节 显微镜的种类 1 第二节 3 第三节 讲课总学时 10
实验内容和学时安排:
实验序号 实验名称 实验内容 实验所需要的时间 实验一 取材和固定 清洗器皿、配置FAA固定液,取材和固定。材料固定时间4小时以上 4小时以上 实验二 脱水和透明 配制各级叔丁醇脱水剂,从低浓度开始将材料逐级进入脱水剂,每级脱水约2小时 10小时 实验三 浸蜡 材料在装有叔丁醇和蜡的蜡管中,并在58-60℃温箱中4-8小时或过夜。 4小时以上 实验四 包埋 折小纸盒若干,将60℃融化的纯石蜡倒入小纸盒中,再快速将材料埋入纸盒的蜡中 4小时以上 实验五 修蜡块和粘蜡块 锯小木块多个作为蜡台,将包埋有材料的蜡块用锋利的刀片修理成一定大小的规则形状,再借助于酒精灯把小蜡块粘牢固在蜡台上 2小时以上 实验六 切片、展片和粘片 在自动磨刀机上磨刀,清洗载玻片,配制粘片剂,在旋转切片机上切片,镜检,在展片台上展片,粘片 6小时以上 实验七 脱蜡、复水、染色和透明 配制各级浓度的酒精,配制番红染液和固绿染液,依次使材料(切片)脱蜡、复水、染色(含镜检)和透明 6小时以上 实验八 封片、清洗和贴标签 清洗盖玻片,用树胶封片,最后清洗和贴标签 2小时以上 实验九 植物显微摄影 利用选进的尼康E800显微镜,学会植物显微摄影的基本操作 2小时以上 实验学时合计 38学时以上
目 录
第一章 概论 4
一、生物制片的目的 4
二、生物制片的类型 4
第二章 石蜡制片 8
第一节 石蜡切片的应用范围 8
第二节 石蜡切片的步骤和原理 8
一、选材 8
二、杀死、固定和保存 8
三、冲洗与脱水 12
四、透明 13
五、浸透(透蜡)和包埋 14
六、切片 16
七、展片和粘片(贴片) 17
八、染色 18
九、封固(封片) 21
第三章 显微镜 22
第一节 显微镜的种类 22
第二节 (复式)显微镜的主要结构 22
一、物镜 22
二、目镜 25
第三节 各类研究用显微镜 25
附件1 植物学实验室工作的注意事项 27
附件2 石蜡制片流程及要点 28
附件3 植物制片的时间安排 33
附表4 植物切片实验记录 33
附件5 植物显微技术实验报告的基本内容 34
第一章 概论
一、生物制片的目的
把想要观察的材料制作成适合于在显微镜下观察的薄片,以显示其组织和细胞的结构。
二、生物制片的类型
(一)临时制片:
1.活体制片法(一种临时制片)
将生物个体或一部分置于载玻片上,加水和盖玻片进行观察。优点:简单、省时,能进行活体观察;缺点:常因组织过厚光线不易透过,活体材料多为无色,未染色,观察效果差,不易长期保存。
(二)永久制片:
1.切片法
用锋利的刀片将材料切成薄片,便于在显微镜下观察。为了能够切出薄而且完整的切片,对幼嫩的材料(如,幼嫩的根尖、茎尖、叶片等)必须进行包埋,对坚硬的材料(如木材
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