第四章发酵培养基的设计范例.pptVIP

第四章 发酵培养基的设计 第一节 培养基的种类 第二节 发酵培养基的设计 第三节 前体物质、促进剂、抑制剂 第一节 培养基的种类 第二节 发酵培养基的设计 第二节 发酵培养基的设计 第二节 发酵培养基的设计 二、设计基本步骤 二、设计基本步骤 第二节 发酵培养基的设计 第三节 前体物质、促进剂、抑制剂 一、前体物质 二、促进剂 二、促进剂 二、促进剂 三、抑制剂 * * * 温故知新 菌种选育指按照生产要求，根据微生物遗传变异理论，利用 、 、 或 等方 法得到优良菌种的工作。 微生物菌种保藏的常用方法有 、 、冷冻干燥保藏法、 、硅胶保藏法和 等。 高丝氨酸缺陷型菌株由于缺乏高丝氨酸脱氢酶，不能合成 ，从而走另一代谢途径，使 大量积累。 温故知新 三级发酵流程 一、定义 选用各种营养物质，经配制用来培养微生物的基质。 二、种类 按成分不同划分 天然培养基 组合培养基 由天然物质配制、成分不清楚、不稳定 麦芽汁培养基 由化学试剂配制、成分精确、稳定 高氏1号、查氏培养基 半组合培养基 主要由天然物质组成，加有某些化学试剂，最常用 马铃薯葡萄糖培养基（PDA） 按物理状态不同划分 固体培养基 液体培养基 液体培养基加入1.5-2.0%琼脂，成为固体状态(或大米、麸皮等组成） 琼脂含量一般为0.5% 不加任何凝固剂 半固体培养基 常用来进行菌种分离、鉴定、保藏和活菌计数等 观察微生物运动、菌种保藏，厌氧菌培养、分离、计数 大规模工业生产、实验室微生物基础理论和应用研究 脱水培养基 含有除水外一切成分的干燥培养基 按功能不同划分 鉴别培养基 用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来 伊红美兰乳糖培养基（EMB） 选择培养基 加入特殊营养物，有利于所需微生物生长或抑制不需要微生物的培养基 加富性、抑制性选择培养基 加有能与目的菌无色代谢产物发生显色反应的指示剂，只需用肉眼辨别颜色就能从近似菌落中找出目的菌 在缺乏氮源的培养基上大部分微生物无法生长； 在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌； 在培养基中加入10％酚可以抑制细菌和霉菌。 选择培养基举例 Left: Escherichia coli cells. Right: E. coli colonies on EMB Agar. 按培养目的不同划分 发酵培养基 种子培养基 为种子扩大培养设计的培养基，营养较丰富，氮源比例较高。与发酵培养基接近。 用于发酵工业，碳源含量较高。价廉易得，有利于下游的分离提取。 孢子培养基 用于孢子萌发，营养充足，容易吸收利用，抑制因子在许可范围内（如辛酸） 营养丰富而完备 pH适当而稳定 发酵单位高 成本、单耗低 周期短 产品质量高 一、设计目标 一、设计原则 “投其所好” 明确目的 是实验室用还是工业大生产用，是种子扩大培养还是生产发酵产物？要求获得菌体还是积累代谢产物，是正常代谢产物还是异常代谢产物，是为异养菌设计的还是为自养菌设计的？ ☆用于培养菌体种子的培养基营养应丰富，氮源含量较高； ☆用于生产代谢产物的发酵培养基氮源一般应比种子培养基低，若代谢产物是次级代谢产物，要考虑是否加入特殊物质； ☆工业生产发酵培养基，应选择来源广泛、价格低廉的原料。 二、设计基本步骤 调查研究 菌种来源、生理特性、生物合成途径,产物化学性质、提炼方法、质量要求等，以便“投其所好”。 培养基成分的确定 C/N比、重要金属非金属等、复合培养试验 发酵条件的确定 温度、起始pH值、溶解氧、氧化还原电位、渗透压等 查阅文献，借鉴经验，借助单因子试验与复合因子试验（如正交试验法）等对培养基成分与发酵条件进行优化。 补料 对碳及氮的代谢予以适当控制，或添加各种养料和前体物质。 不