肿瘤生物治疗CAPRI技术__培训课件.pptVIP

三、各种治疗方式的不足 过继性免疫疗法存在的问题 由于肿瘤细胞的不均一性及效应细胞的异质性造成疗效的不确定性; 体外大量扩增过继免疫细胞技术有待开发； 输注的细胞向肿瘤组织的聚集性弱; 体内过继免疫机制的进一步明确； 与其它肿瘤治疗方法的有机整合需要进一步完善； 缺乏统一的能指示临床转归的的免疫检测指标； 三、各种治疗方式的不足 肿瘤单克隆抗体靶向治疗的缺点 ①一是实体肿瘤的细胞被致密的基质包裹，抗体难以穿透这一屏障；大多数实体肿瘤都存在淋巴回流障碍，导致间质内压力升高，阻止了抗体进入肿瘤实质。 ②二是由于治疗肿瘤的抗体需要量极多，要求产品纯度极高，目前的生物工程生产比较困难，因此其产品生产成本及价格均非常昂贵 ?? ③三是肿瘤细胞的异质性，目前的抗体治疗是针对肿瘤细胞某个特异性受体，而肿瘤细胞并非均一，因此单一清除含有某种受体的肿瘤细胞并不代表能治愈了肿瘤， 目前一些治疗方法是在抗体中标上同位素或毒素，尽管提高疗效，但其副作用亦随着增加。 三、各种治疗方式的不足 基因治疗的不足 安全性是基因治疗的第一要素。有接受以腺病毒为载体的OTC 基因治疗4天后死亡。 体内靶向基因治疗办法不多。若治疗基因不只进入肿瘤细胞，也进入正常细胞，使后者功能异常。 治疗基因若误入生殖细胞，影响将传给下一代。 大力加强外源基因在不同组织学类型肿瘤中特异表达和调控途径的研究， 当下的艰巨任务。 三、各种治疗方式的不足 肿瘤疫苗的潜在危险 以照射、病毒感染、基因重组后的肿瘤细胞为疫苗者，肿瘤细胞的致瘤性虽大大降低，但也不完全排除其注入体内致瘤的可能性； 各种疫苗载体注入体内，有将传染性或其他毒性分子带给病人的潜在危险； 机体产生的肿瘤抗原抗体有引起自身正常组织产生过敏反应或自身免疫性疾病的可能； 利用基因工程肿瘤疫苗时，外源基因持续表达外源抗原或插入激活内源性致癌基因，有引起新的疾病和致癌的可能。 四、CAPRI 链式激活的免疫细胞（cascade primed immune cells，CAPRI） 徳国慕尼黑大学医学院免疫研究所Rudolf Wank 教授的一项用于肿瘤生物治疗的专利技术 该技术是应用患者的外周血淋巴细胞， 经活化刺激，获得对肿瘤的特异性杀伤功能，回输后可在体内杀伤肿瘤。 CAPRI 细胞治疗疗效的限制因素 确定诱导免疫反应和应答的抗原是哪一种抗原是很困难的。 既使这个问题得到解决，肿瘤细胞经常选择性地丢失肿瘤特异性抗原 肿瘤细胞可在局部产生细胞因子来降低效应细胞的杀肿瘤能力 需要大量细胞因子的参与和刺激免疫效应，传统方法里面，刺激因子是不充分的 因此，难以达到理想的杀伤效果。 CAPRI 针对以上问题，Wank教授发明了通过级联引发的刺激外周血单个核细胞的CAPRI细胞。 ①病人外周血经分离 获得单个核细胞 ②经固化的抗CD3单 克隆抗体及细胞因子 激活，使DC成熟 ③再次加入未经激活的 外周血淋巴细胞 ④加入细胞因子，整个 过程5天 CAPRI CAPRI解决问题 初级刺激所激活的抗原呈递细胞本身在体内已接触过肿瘤抗原，且具有记忆功能，因此可在体外有效地诱导对自身病人特异性的免疫应答，所以本方法无需确定病人的肿瘤抗原 肿瘤细胞经常有意识地丢失掉表面HLA（人类白细胞抗原）的表达，从而逃避杀伤细胞尤其CTL细胞的杀伤。实验表明，CAPRI细胞可以显著上调肿瘤细胞表面的HLA表达，使杀伤细胞很容易识别并启动免疫杀伤过程 CAPRI细胞在体外已被有效活化，进入体内后将不受细胞因子及共刺激因子的限制 CAPRI CAPRI的四大优势 CAPRI 与CIK细胞疗法的比较 项目 CIK CAPRI 说明 培养过程 一步培养扩增获得效应细胞 １）第一步培养的目的不是获得效应细胞，而是具有抗原提呈功能的DC和下一步刺激的细胞因子环境；２）初步刺激激活的DC在体内接触过抗原，具有记忆功能，可有效刺激PBMC的激活； 从CIK基础上改进的方法 MHC限制性 只杀伤不表达MHC分子的肿瘤细胞 CTL、Th杀伤表达或高表达MHC分子的肿瘤细胞，NK、NKT杀伤不表达MHC的肿瘤细胞 人类肿瘤细胞中，表达MHC分子的肿瘤细胞约占80%，不表达MHC分子的细胞约占20% 效应细胞效应细胞 CD3+和CD56+细胞，即NKT细胞；记忆细胞：29% Th和CTL细胞为主，另有少量NK、NKT、DC细胞等；记忆细胞：49% CAPRI的效应细胞中NKT细胞约占20%，CTL和Th细胞约占80%，而CIK效应细胞均为NKT细胞； CAPRI 恢复和上调HLA 在肿瘤细胞表面的表达 在效应细胞：肿瘤细胞（E:T，或效靶比）为1：5条件下，CIK细胞与乳腺癌细胞共同孵育5小时，乳腺癌细