DNA提取精篇课件.pptVIP

《恒谦教育教学资源库》 教师备课、备考伴侣 专注中国基础教育资源建设 编辑发行：西安恒谦教育科技股份有限公司 全国统一客服电话：400-715-6688 《恒谦教育教学资源库》 教师备课、备考伴侣 专注中国基础教育资源建设 * 第二课时 * DNA的提取与鉴定 DNA提取试剂盒 你知道DNA有何特性吗？ * 探究一 DNA的粗提取 1、DNA的提取原理 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 * DNA在酒精溶液中的溶解性 　　DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些脂溶性物质则可以溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与其他物质进一步分离纯化。 * 2．用品分析 (1)材料：鸡血 实验中用鸡血作为实验材料有三个原因：一是鸡血中血细胞含量高，DNA含量丰富；二是材料易得；三是鸡血细胞极易吸水涨破。 (2)器具 本实验过程中最好使用塑料烧杯和试管。因为玻璃表面带电荷，DNA中的磷酸基也带电荷，因而易被吸附于玻璃表面，故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。 * (3)试剂 在DNA鉴定中所用的二苯胺是一种有毒性的试剂，在使用时注意不要让药液接触到皮肤或身体的其他部位，也不要近距离观察。 * 3．实验步骤 边做边学 * 边做边学 * 边做边学 * 边做边学 * 继续探究 探究二 　探究二 DNA的鉴定 * 4．归纳提升 (1)加入抗凝剂的目的 制备鸡血细胞液时要在取新鲜鸡血的同时加入抗凝剂，防止血液凝固。 (2)实验中几次重复操作的目的 ①实验中有两次使用蒸馏水 a．第一次在第2步，目的是使血细胞吸水涨破； b．第二次在第4步，目的是为了稀释NaCl溶液，析出DNA。 * 方法步骤 加入物质 目的 1 . 制备鸡血细胞液 柠檬酸钠溶液 ① 2 . 提取鸡血细胞细胞核物质 20 m1 蒸馏水 ② 3 . 溶解细胞核内的 DNA 2 m1 ／ L 的 NaCI 溶液 40 mL ③ 4 . 析出含 DNA 的黏稠物 蒸馏水 ④ 5 . 滤取含 DNA 的黏稠物 ⑤ 6 . 将 DNA 的黏稠物再溶解 2 mol ／ L 的 NaCl 溶液 20 mL ⑥ 7 . 过滤含 DNA 的 NaC l 溶液 ⑦ 8 . 提取含有杂质较少的 DNA 冷却的 95 ％的酒精 50 mL ⑧ A : (1) 向试管中加入 2mol ／ L 的 NaCl 溶液 5 mL (2) 加入 DNA (3)4 mL 二苯胺试剂 9 . DNA 的鉴定 B : (1) 向试管中加入 2mol ／ L 的 NaCl 溶液 5 mL (2)4 mL 二苯胺试剂 ⑨ * ①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固 ②加速血细胞破裂 ③溶解DNA ④使2mol/L的NaCl溶液稀释至0.14mol/L使得DNA最大限度地释出 ⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上 ⑥使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中 ⑦除去含DNA的滤液中的杂质 ⑧提取DNA ⑨ A出现蓝色 B无变化 * 下列操作中，对DNA的提取量影响较小的是（ ） A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出DNA等核物质 B．搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动 C．在析出DNA粘稠物时，要缓缓加入蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增多 D．在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却 E．在DNA的溶解和再溶解时，要充分搅拌 课堂巩固 * 2.在“DNA的粗提取与鉴定实验”中： （1）实验中两次使用蒸馏水，第一次目的是 ，第二次目的是 。 （2）说明不同浓度的NaCl溶液的作用：2mol/L NaCl的作用 ；0.14mol/L NaCl的作用 ； （3）提纯DNA的原理是 ，所用试剂为 。搅拌要 ，目的 。 （4）能否用哺乳动物血液代替？简述理由。 * 答案： （1）使血细胞吸水破裂，溶解细胞核内的DNA；降低NaCl溶液的浓度，降低DNA分子在NaCl溶液中的溶解度析出DNA分子 （2）溶解含DNA的核物质；使含DNA的丝状粘稠物析出DNA分子； （3）DNA不溶于酒精溶液，但细胞中某些盐类蛋白质可溶于酒精溶液；95%的冷却酒精；轻缓、同方向；保持DNA分子的完整性 （4）不能，成熟的哺乳动物红细胞没有细胞核 * 3.向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中不