第八章病毒的遗传解决方案.ppt

第八章 病毒的遗传分析 学习要点: 1??噬菌体的突变型及基因重组的特点； 2 噬菌体的互补测验与顺反子测定； 3 用两点测交与三点测交测定噬菌体交换值; 4 ?噬菌体基因组结构特点； 5 原噬菌体对细菌基因重组的影响(合子诱导）; 6 噬菌体的线状染色体与环状连锁图。 第一节 噬菌体的繁殖和突变型 一 噬菌体的繁殖 （一）烈性噬菌体的感染周期 （二）温和性噬菌体的感染周期 1 溶源周期： 原噬菌体: 溶源性细菌: 溶源性细菌的特点: 2 裂解周期： 溶源性细菌?自发或经诱发?裂解细菌 ↓释放 子噬菌体。 二 噬菌体的突变型 (一)快速溶菌突变型（r） (二)宿主范围突变型（h） (三) 条件致死突变型 1 温度敏感突变型 2 抑制因子敏感突变（sus） 噬菌体 细菌 正常基因 sus+ su- 突变基因 sus su+ 表8-2携带不同专一性抑制基因宿主中sus突变噬菌体的表现 （二）无义突变与无义抑制突变 无义突变：指一个为氨基酸编码的密码变为终止密码的突变。 无义抑制突变：指能抑制无义突变表现的突变。 噬菌体突变型 １快速溶菌突变型： 2??宿主范围突变型: 3 条件致死突变型： 1 噬菌体杂交实验 r47r+ X r+r104 B 10-6 10-2 B K(?) 亲组合：r47r+、r+r104， r+r+ 重组合：r+r+、r47r104， 共525 共370 2 重组值的计算 重组值＝重组噬菌斑数 X 100％ 总噬菌斑数 第三节 互补试验 rIIA+B X rIIAB+ 二 顺反子（基因） 2 顺反试验：指将两个拟突变分别处于顺式和反式， 根据其表型确定两个突变是否是同一基因的试验。 三 互补测验及结果 表8-8 ?X174突变的互补测验结果 顺反子 突 变 型 A am8,am18,am30,am33,am35,am50,am86,tsl28, B am14,am16,och5,ts9,tsl16,och1,och8,och11, C och6 D am10,amH81, E am3,am6,am27, F am87,am88,am89, amH57,op6, op9,tsh6,ts41D G am9,am32,ts,ts79 H amN1,am23,am80,am90,ts4 T4突变型的互补试验 四 基因内互补 第四节 缺失作图 一 缺失的特点 1 多bp的缺失； 2 具不可逆性； 3 有部分相同缺失突变型间不能通过重组恢复 野生型表型。 二 缺失作图的优点：简便、精确 三 缺失作图的条件 四 缺失作图的原理 P202 原理：凡是能重组的，点突变一定不在缺失区内； 凡是不能重组的，点突变一定在缺失区内。 五 缺失作图的方法 步骤：如图8-15 1 将待测点突变（X）先与几个最大的缺失突变体 分别杂交，从中找出最小不重组和最大可重组 缺失突变； 2 从最小不重组区（PB242）中减去与之重叠的最 大重组区（A105）=点突变的位置（A5区内）。 3 将点突变与A5区内的几个缺失突变体分别杂交 根据结果确定：点突变就在A5区内的c2区内。 第五节 ?噬菌体基因组与原噬菌体 一 ?噬菌体的基因组：由49000bp构成 1 基因分类 头部基因： 7个（必需基因：相邻） 尾部基因： 11个（必需基因：相邻） 噬菌斑形成必需的基因 复制所需基因：O、P 裂解、释放所需基因：S、R 基因 正调控基因：N、Q 附着区：att； 专一性重组所必