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第二章 蛋白质的共价结构 蛋白质通论蛋白质的化学组成和分类 蛋白质含量的测定——凯氏定氮法 氮占生物组织中所有含氮物质的绝大部分。因此,可以将生物组织的含氮量近似地看作蛋白质的含氮量。由于大多数蛋白质的含氮量接近于16%,所以,可以根据生物样品中的含氮量来计算蛋白质的大概含量。 一般,样品含氮量平均在16%,取其倒数100/16=6.25,即为蛋白质换算系数,其含义是样品中每存在1g元素氮,就说明含有6.25g 蛋白质; ※ 蛋白质含量=氮的量×6.25 优点:对原料无选择性,仪器简单,方法简单; 缺点:易将无机氮(如核酸中的氮),都归入蛋白质中,不精确。 单纯蛋白质的分类 这类蛋白质只含由?-氨基酸组成的肽链,不含其它成分。 清蛋白和球蛋白:(albumin and globulin)广泛存在于动物组织中。清蛋白易溶于水,球蛋白微溶于水,易溶于稀酸中。 谷蛋白(glutelin)和醇溶谷蛋白(prolamin):植物蛋白,不溶于水,易溶于稀酸、稀碱中,后者可溶于70-80%乙醇中。 精蛋白和组蛋白:碱性蛋白质,存在与细胞核中。 硬蛋白:存在于各种软骨、腱、毛、发、丝等组织中,分为角蛋白、胶原蛋白、弹性蛋白和丝蛋白。 结合蛋白质的分类 糖蛋白:由简单蛋白与糖类物质组成。如细胞膜中的糖蛋白等。 脂蛋白:由简单蛋白与脂类结合而成。含三酰甘油、胆固醇、磷脂。如血清?-,?-脂蛋白等。 核蛋白:由简单蛋白与核酸结合而成。如细胞核中的核糖核蛋白等。 色蛋白:由简单蛋白与色素物质结合而成。如血红蛋白、叶绿蛋白和细胞色素等 磷蛋白:由简单蛋白质和磷酸组成。如胃蛋白酶、酪蛋白、角蛋白、弹性蛋白、丝心蛋白等。 蛋白质分子的形状和大小根据形状和溶解度分为三大类: 估算氨基酸残基数目 对于不含辅基的简单蛋白质,用110除它的相对分子质量,即可约略估算出其残基数。 蛋白质中20种氨基酸的平均相对分子质量约为138,但在多数蛋白质中较小的氨基酸占优势,因此平均相对分子质量约128 每形成一个肽键失去一分子水(相对分子质量18),氨基酸残基的平均相对分子质量约为110。 蛋白质功能的多样性 1.酶:作为酶的化学本质,温和、快速、专一,任何生命活动之必须,酶的另一化学本质是RNA,不过它比蛋白质差远了,种类、速度、数量。2.免疫系统:防御系统,抗原(进入“体内”的生物大分子和有机体),发炎。细胞免疫:T细胞本身,分化,脓细胞。体液免疫:B细胞,释放抗体,免疫球蛋白(Ig)。3.肌肉:肌肉的伸张和收缩靠的是肌动蛋白和肌球蛋白互动的结果,体育生化。4.运输和储存氧气:Hb和Mb。 蛋白质功能的多样性 5.激素:含氮类激素,固醇类激素。6.基因表达调节:操纵子学说,阻遏蛋白。 7.生长因子:EGF(表皮生长因子),NGF(神经生长因子),促使细胞分裂。8.信息接收:激素的受体,糖蛋白,G蛋白。9.结构成分:胶原蛋白(肌腱、筋),角蛋白(头发、指甲),膜蛋白等。生物体就是蛋白质堆积而成,人的长相也是由蛋白质决定的。10.精神、意识方面:记忆、痛苦、感情靠的是蛋白质的构象变化,蛋白质的构象分类是目前热门课题。11.蛋白质是遗传物质?只有不确切的少量证据。如库鲁病毒,怕蛋白酶而不怕核酸酶。 二.肽 一个氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基之间失水形成的酰胺键称为肽键,所形成的化合物称为肽。 由两个氨基酸组成的肽称为二肽,由多个氨基酸组成的肽则称为多肽。组成多肽的氨基酸单元称为氨基酸残基。 在多肽链中,氨基酸残基按一定的顺序排列,这种排列顺序称为氨基酸顺序。 通常在多肽链的一端含有一个游离的?-氨基,称为氨基端或N-端;在另一端含有一个游离的?-羧基,称为羧基端或C-端。 氨基酸的顺序是从N-端的氨基酸残基开始,以C-端氨基酸残基为终点的排列顺序。如上述五肽可表示为: Ser-Val-Tyr-Asp-Gln 肽与肽键 肽与肽键 肽键平面 不可能的空间构象 二硫键 2.多肽链的拆分:由多条多肽链组成的蛋白质分子,必须先进行拆分。几条多肽链借助非共价键连接在一起,称为寡聚蛋白质,如,血红蛋白为四聚体,烯醇化酶为二聚体;可用8mol/L尿素或6mol/L盐酸胍处理,即可分开多肽链(亚基). 3.二硫键的断裂:几条多肽
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