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高中生物新课程教材显微镜观察实验分析223600） 陈卫东 本文发表于《实验教学与仪器》2012年11期 一、概念：显微镜观察实验就是指在实验过程中，由于所要观察的对象比较小，必须借助于显微镜才能完成的实验。 二、新课程显微镜观察类实验内容： 序号 实验名称 使用的目的或作用 1 使用高倍显微镜观察几种细胞 观察不同细胞结构和形态 2 检测生物组织中的脂肪 观察细胞中的脂肪颗粒 3 观察DNA和RNA在细胞中的分布 观察细胞中的DNA和RNA分布 4 体验制备细胞膜的方法 观察细胞变化 5 用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 观察叶绿体和线粒体 6 植物细胞的吸水和失水 观察细胞的质壁分离和复原过程 7 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 观察植物根尖细胞有丝分裂各时期 8 观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片 观察蝗虫精母细胞减数分裂各时期 9 低温诱导植物染色体数目的变化 观察植物细胞中染色体数目的变化 10 培养液中酵母菌种群数量的变化 观察酵母菌数量 11 土壤中小动物类群丰富度的研究 使用低倍镜观察土壤中体型小的动物 12 鉴别细胞死活（为课后练习实验） 观察细胞死活 三、实验操作需要注意问题： 1．注意取材：由于在实验过程中需要借助于显微镜观察，因此对实验材料都要有以下一些要求：首先是容易取材，最好是身边常见的材料；其次是材料要容易制片；第三是材料要容易观察，尽量不选用干扰大的材料；第四是选材要适合所要实验的对象等。 序号 实验名称 常选用材料 1 使用高倍显微镜观察几种细胞 尽可能选用不同类型的细胞 2 检测生物组织中的脂肪 脂肪含量高且容易制作切片的种子 3 观察DNA和RNA在细胞中的分布 人口腔上皮细胞或其他动物细胞 4 体验制备细胞膜的方法 哺乳动物红细胞 5 用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体 观察叶绿体常选用新鲜藓类的叶或菠菜叶下表皮（带少量叶肉）；观察线粒体选用人口腔上皮细胞 6 植物细胞的吸水和失水 紫色洋葱外表皮细胞 7 观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 洋葱、大葱或蒜根尖分生区细胞 8 观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片 蝗虫精巢固定装片 9 低温诱导植物染色体数目的变化 洋葱、大葱或蒜根尖分生区细胞 10 培养液中酵母菌种群数量的变化 酵母菌细胞 11 土壤中小动物类群丰富度的研究 土壤中体型小的动物 12 鉴别细胞死活 无特别要求 2．材料处理：显微镜观察要求细胞要是单层或单个才能观察清楚，有的颜色太浅不容易观察，而有的实验过程要求细胞始终保持活性，因此在实验过程中要根据不同材料，不同的观察对象，做不同的材料处理，如切片、撕取、浸泡、染色、解离、保持生活状态等。 检测生物组织中的脂肪时，需要对花生或大豆等实验材料先浸泡后切片，然后利用苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）进行染色，观察到的细胞中的脂肪颗粒呈橘黄色（苏丹Ⅳ则呈红色）；观察DNA和RNA在细胞中的分布实验则先需用盐酸溶液浸泡处理，再利用甲基绿和吡罗红混合染液染色，观察到的现象是RNA被染成红色而DNA被染成绿色；体验制备细胞膜的方法实验则要用清水处理哺乳动物红细胞，在显微镜下观察被清水胀破的红细胞的形态；用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体实验要求对藓类的叶直接观察，菠菜叶则要求撕取下表皮（要带少量叶肉），利用口腔上皮细胞观察线粒体则需利用活性染色剂健那绿对线粒体染色，在显微镜下可以观察到蓝绿色的线粒体；植物细胞的吸水和失水实验要撕取紫皮洋葱外表皮做成装片，在实验过程中要使细胞始终保持生活状态；观察根尖分生组织细胞的有丝分裂实验和低温诱导植物染色体数目的变化实验都要对实验材料（根尖分生区）解离并用龙胆紫染液（或醋酸洋红液）染色并压片使细胞分散开，能观察到被染成深紫色（或紫色）的染色体；鉴别细胞死活则需要用台盼蓝染液染色，在显微镜下看到活细胞不能被染色，而死细胞则会被染成蓝色。 3．注意显微镜操作要求：显微镜的使用是高中学生必须掌握的实验技能之一，如果学生不能熟练掌握使用显微镜，势必会影响生物学的学习。因此，教师有必要花大力气帮助每位学生学习、掌握这一必要的技能。在操作过程中要注意指导学生如何正确使用高倍显微镜对光→放置装片→调试低倍镜观察→移动装片→转动转换器→换至高倍镜→调节细准焦螺旋→调节光圈（或反光镜）→观察。显微镜使用后要注意保养，将显微镜擦拭干净，并将各镜头、反光镜归位，放置回原处保存等。 四、拓展和延伸： 课本上的实验我们需要认真的理解和领会，但是也要注意从全新的、应用的角度去重新分析已做过的每一个实验，从中提取出真正要掌握的重要内容。主要包括两部分内容：一是每个实验的设计思想、设计思路；二是每个实验中最基本的实验方法和技术（如显微镜、切片、临时装片的制作等）。在知识掌握的同时，还要注意拓展和延伸，使得自己的