高效液相色谱法-食品中苏丹红II的测定..docVIP

高效液相色谱法测定食品中 苏丹红II号的不确定度报告 1.目的 对食品中苏丹红II号测定的不确定度进行分析，找出影响其不确定度的因素，对不确定度进行评估，如实反映测量的置信度和准确性。 2. 适应范围 适用于高效液相色谱法测定食品中苏丹红II号的测定。 3. 职责 3.1检测人员负责按操作规程操作仪器，了解影响不确定度的因素，确保测量过程中仪器正常运作转，消除各种可能影响实验结果的意外因素，掌握不确定度的计算方法。 3.2 校核人员负责检查原始记录及不确定度的计算方法。 3.3 技术负责人负责审核监测结果和不确定度分析结果。 4. 不确定度分析 4.1方法简述 样品经溶剂提取、固相萃取净化后，用反相高效液相色谱－紫外可见检测器进行色谱分析，采用外标法定量。 4.2 数学模式 计算公式： X= 其中：X—样品中苏丹红II号的含量，mg/kg C—由标准曲线得出的样液中苏丹红的浓度，（μg/m L） V—样品定容体积，mL m—样品质量，g 4.3 传播定律 U2rel（x）=U2rel（C）+U2rel（V）+U2rel（m） 5. 计算标准不确定度 5.1 样品定容的标准不确定度分量U（V） 5mL的容量瓶的最大允许误差为±0.02ml，属均匀分布，则容量瓶的标准不确定度为： U瓶=0.02/=0.0115(mL)，Urel瓶= U瓶/V瓶=0.0115/5=2.3×10-3 U（V）= U瓶=0.00115mL，Urel（V）=Urel瓶=2.3×10-3 U2rel（V）=5.29×10-6 5.2 样品称量的标准不确定度分量U（m） 样品的质量m=2.000g，标准不确定度U（m）=0.5mg/=0.289mg U rel（m）= U（m）/ m=0.289/2000=1.44×10-4 U2rel（m）=(1.44×10-4)2=2.07×10-8 5.3样品测试在标准曲线的苏丹红II号浓度的标准不确定度U（C） U2rel（C）=U21, rel +U22, rel+U23, rel+ U24, rel 其中：U1来源于回归曲线产生的不确定度，U2来源于仪器读数的标准不确定度，U3来源于标准样品的不确定度，U4来源于样品重复测定的标准不确定度。 （1）来源于回归曲线产生的不确定度U1 采用最小二乘法对标准溶液的测量数据进行线性回归，得到回归直线（标准曲线）方程为： y=a+bC 其中y为峰面积，a为截距，b为斜率，C为苏丹红I号含量（μg/m L）。 表1 标准溶液测定结果及中间计算结果一览表 Ci（μg/mL） yi yi－ 0 0 －748 －748 0.160 12270 12522 251 0.320 23830 22955 －875 0.640 49892 49510 -382 1.280 101554 101793 239 2.560 203455 203532 77 ：0.061 ： ——— ——— 根据测量数据及线性回归法求出标准工作曲线： a =-748.3615 b =79736.25 r2 =0.999941 其回归直线（标准曲线）为： y=-79931.14 C-1091.36 标准偏差Sy： ==631.9 式中:yi—仪器的各点响应值； —Ci在回归方程得到的吸光度值； n—测试校准溶液的次数（n=6）； 重复测量样品溶液8次,测得8个数据(μg/mL)：。平均值：y0 =7927，得到C0 =0.061μg/mL。 表2.样品重复测量的数据 1 2 3 4 5 6 7 8 平均值 浓度 0. 063 0.050 0.074 0.052 0.053 0.072 0.061 0.061 C0：0.061 面积 y0 ：7927 则该样品来源于回归曲线产生的不确定度u1 =0.005μg/mL 其中：C0—测试样品的含量（C0 =0.061μg/mL） p—测试C0的次数（p=8）； i—获得校准曲线的测量次数(i=5)； 则：U21,rel=（U1/C0）2=（0.005/0.061）2=0.0067 （2）来源于仪器标准不确定度U2 U2=3.7%　　　 U22 rel =（）2=4.56×10-4 （3）来源于标准样品的不确定度U3 标准物质是Dr.Ehrenstorfer公司提供：SUDAN2：3118-97-6，纯度：９0.0％±2.0%。取１1.1111mg标准品，溶解