环境工口程微生物学第七章微生物遗传.pptVIP

接合 (conjugation)： 细胞与细胞的直接接触（由F因子介导） 转导(transduction)： 由噬菌体介导 自然遗传转化(natural genetic transformation)： 游离DNA分子 + 感受态细胞 “接合” “转导” 及“自然转化”这三种在自然界中 存在的细菌遗传重组过程各自的特点： a）外源DNA的来源及进入途径有差异； b）决定因素也各有不同； 证明Ames试验重要性的应用实例： 国外曾开发了一种降低妇女妊娠反应的药物“反应停”，由于其药效显著，在60-70年代十分流行，但随后人们就发现畸形儿的出生率明显增高，而且生产畸形儿的妇女大多曾服用“反应停”，后来采用Ames试验发现这种物质的确具有很强的致突变作用，因此这种药物被禁止使用.但如果能在这种药物上市之前就进行Ames试验检测，那么这种大量出生畸形儿的悲剧完全可以避免。 第五节 细菌基因转移和重组 细菌的三种水平基因转移形式 接合 转导 自然转化 一、细菌的接合作用(conjugation) 通过细胞与细胞的直接接触而产生的 遗传信息的转移和重组过程 1.实验证据 1946年，Joshua Lederberg 和Edward L.Taturm 细菌的多重营养缺陷型杂交实验 证实接合过程需要细胞间的直接接触的 “U”型管实验（ Bernard Davis，1950 ） 2. 机制 (大肠杆菌的接合机制) 接合作用是由一种被称为F因子的质粒介导 F因子通常为环状, 大小约为细菌组DNA的2%, 94.5kb ， 上面有编码细菌产生性菌毛（sex pili）及控制接合过程 进行的20多个基因。 含有F因子的细胞：“雄性”菌株（F+），其细胞表面有性菌毛 不含F因子的细胞：“雌性”菌株（F-），细胞表面没有性菌毛 2. 机制 F因子为附加体质粒 既可以脱离染色体在细胞内独立存在，也可插入（整合）到染色体上 F因子的四种细胞形式 a）F-菌株， 不含F因子，没有性菌毛，但可以通过 接合作用接收 F因子而变成雄性菌株（F+）； b）F+菌株， F因子独立存在，细胞表面有性菌毛。 c）Hfr菌株，F因子插入到染色体DNA上，细胞表面有性菌毛。 d）F′菌株，Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时， 形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，特称为F′因 子。 细胞表面同样有性菌毛。 1） F+×F-杂交 杂交的结果：给体细胞和受体细胞均成为F+细胞 理化因子的处理可将F因子消除而使F+菌株变成F-菌株 F+菌株的F因子向F-细胞转移，但含F因子的宿主细胞 的染色体DNA一般不被转移。 2）Hfr ×F-杂交 2）Hfr ×F-杂交 Hfr菌株仍然保持着F+细胞的特征，具有F性菌毛，能够与F-细胞进行接合。所不同的是，细菌发生接合后，F因子的先导区(leading region)结合着染色体DNA向受体细胞转移，F因子除先导区以外，其余绝大部分是处于转移染色体的末端，由于转移过程常被中断， 因此F因子不易转入受体细胞中，故Hfr×F-杂交后的受体细胞 (或接合子)大多数仍然是F-。 Hfr菌株的F因子插入到染色体DNA上，因此只要发生接合转移 过程，就可以把部分甚至全部细菌染色体传递给F-细胞并发生重组 ，由此而得名为高频重组菌株。 2）Hfr ×F-杂交 染色体上越靠近F因子的先导区的基因，进入的机会 就越多，在F-中出现重组子的频率也高。 F因子不易转入受体细胞中，故Hfr×F- 杂交后的受体细胞（或称接合子）大多 数仍然是F-。 3）F′×F-杂交 Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时，形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，称为F′因子; F′×F-与F+×F-的不同：给体的部分染色体基因随F′一起转入受体细胞; 3）F’×F-杂交 二、细菌的转导（transduction） 由噬菌体介导的细菌细胞间进行遗传交换的一种方式： 一个细胞的DNA通过病毒载体的感染转移到另一个细胞中 能将一个细菌宿主的部分染色体或质粒DNA 带到另一个细菌的噬菌体称为转导噬菌体 细菌转导的二种类型： 普遍性转导 局限性转导 1、普遍性转导（generalized transduction） (1) 意外的发现 1951年，Joshua Lederberg和Norton Zinder为了证实大肠杆菌以外 的其它菌种是否也存在接合作用，用二株具不同的多重营养缺陷型 的鼠伤寒沙门氏菌进行类似的实验： 用“U”型管进行同样的实验时，在给体和受体细胞不接触的情况下，同样出现原养型细菌！ 沙门氏菌LT22A是携带P22噬菌体的溶源性细菌