第02口章核酸的结构与功能.ppt

DNA解链过程示意图 高温等 极端条件 双链DNA 局部解链DNA 大部分解链DNA 单链DNA DNA解链时的紫外吸收变化 增色效应(hyperchromic effect)：DNA变性时其溶液260nm紫外吸收增高的现象。 DNA的解链曲线 连续加热DNA的过程中以温度相对于A260值作图，所得的曲线称为解链曲线。 解链温度(melting temperature，Tm)：解链过程中，紫外吸光度的变化达到最大变化值的一半时所对应的温度。 解链温度与核酸链碱基组成的关系 G+C 含量越高，解链温度就越高 四、核酸的理化性质 （四）变性的核酸可以复性或形成杂交双链 当变性条件缓慢地除去后，两条解离的互补链可重新配对，恢复原来的双螺旋结构，这一现象称为DNA复性(renaturation) 。 热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火(annealing) 。 减色效应：DNA复性时，其溶液A260降低。 一种特殊的复性：核酸分子杂交(hybridization) 不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件可以在不同的分子间形成杂化双链(heteroduplex)。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子间或者RNA与RNA分子间形成。这种现象称为核酸分子杂交。 核酸分子杂交示意图 核酸分子杂交的应用 研究DNA分子中某一种基因的位置。 鉴定两种核酸分子间的序列相似性。 检测某些专一序列在待检样品中存在与否。 主要内容 一、核酸的化学组成及一级结构 二、DNA的空间结构与功能 三、RNA的结构与功能 四、核酸的理化性质 五、核酸酶 五、核酸酶 核酸酶是指所有可以水解核酸的酶。 依据底物不同分类 DNA酶(deoxyribonuclease, DNase)：专一降解DNA。 RNA酶 (ribonuclease, RNase)：专一降解RNA。 依据切割部位不同 核酸内切酶：又分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。 核酸外切酶：又5′→3′或3′→5′核酸外切酶。 核酸酶作用示意图 外切位点 (5?3外切酶) 外切位点 (3 ? 5外切酶) 内切位点 内切位点 限制性核酸内切酶的作用机制 GAATTC CTTAAG 回文结构 五、核酸酶 参与DNA的合成、修复以及RNA的剪接 清除多余的、结构和功能异常的核酸，以及侵入细胞的外源性核酸 降解食物中的核酸 体外重组DNA技术中的重要工具酶 主要内容 一、核酸的化学组成及一级结构 二、DNA的空间结构与功能 三、RNA的结构与功能 四、核酸的理化性质 五、核酸酶 * * * 真核生物mRNA的帽结构及加帽过程 转录 DNA 去除γ磷酸基团 5’-5’三磷酸形成 G7位上甲基化 在G后的第一或第二个核苷酸的C-2’上的甲基化 hnRNA 三、RNA的结构与功能 （二）mRNA是蛋白质合成的模板 2.在真核生物mRNA的3末端有多聚腺苷酸结构 三、RNA的结构与功能 （二）mRNA是蛋白质合成的模板 3. 真核生物mRNA的成熟过程是hnRNA的剪接过程 hnRNA mRNA 外显子 内含子 DNA 转录 卵清蛋白mRNA的成熟 hnRNA 剪接、剪切 及首尾修饰 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因 三、RNA的结构与功能 （二）mRNA是蛋白质合成的模板 4. mRNA的功能： mRNA依照自身的碱基顺序指导蛋白质氨基酸顺序的合成 从mRNA分子5末端起的第一个AUG开始，每3个核苷酸为一组称为密码子(codon)或三联体密码(triplet code) ，每一个密码子编码了一种氨基酸 AUG被称为起始密码子 决定肽链终止的密码子则称为终止密码子 mRNA是合成蛋白质的模板 5... AUG CAC ACU GGA ... GCU UAA ...3 mRNA N 蛋 - 组 - 苏 - 甘 ... 丙 C 蛋白质肽链 蛋白质合成（翻译） AUG既是起始密码子，同时又是蛋氨酸的密码子 三、RNA的结构与功能 （二）mRNA是蛋白质合成的模板 4. mRNA的功能：mRNA依照自身的碱基顺序指导蛋白质氨基酸顺序的合成 位于起始密码子和终止密码子之间的核苷酸序列称为开放阅读框(open reading frame, ORF)，决定了多肽链的氨基酸序列 。 成熟的mRNA的结构 开放阅读框（ORF） 起始密码子 终止密码子 PPP 5? 3? 蛋白质 真核生物mRNA的结构 原核生物mRNA的结构 三、RNA的结构与功能 （三）tRNA是蛋白质合成的氨基酸载体 1. tRNA的