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实验6_淀粉酶固定化及淀粉水解作用的检测[精选]
四、α-淀粉酶固定化及淀粉水解作用检测的实验 * 固定 化酶 直接使用酶 不足 优点 类型 二. 直接使用酶和固定化酶的优缺点 固定化酶:将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 催化效率高, 低耗能、 低污染等 1.对环境条件很敏感,易失活; 2.溶液中的酶很难回收再利用, 提高了生产成本; 3.反应后酶会混在产物中, 可能影响产品质量。 1 提高了酶的稳定性,可 较长时间贮存和使用 2 可被反复利用,更经济 更利于工厂化生产。 3、既可与反应物接触又 可以与产物分离,产物更 易纯化。 一种酶只能催化一种化学反应, 而在生产实践中,很多产物的 形成都通过一系列的酶促反应 才能得到的 酶的固定化方法 酶的固定化方法主要可分为四类:吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。 (1)吸附法:包括物理吸附法和离子吸附法 物理吸附法 酶 (2)共价偶联法 是将酶与聚合物载体以共价键结合的固定化方法。 载体 共价键 (3)交联法 交联法:是使用双功能或多功能试剂使酶分子 之间相互交联呈网状结构的固定化方法。 戊二醛 (4)包埋法:包括凝胶包埋法和微胶囊包埋法 常用的载体有海藻酸钠凝胶 微胶囊包埋法,酶被包埋成微胶囊型 凝胶包埋法,酶被包埋成网格型 常用的载体有聚酰胺、 火棉胶、醋酸纤维素 将酶包裹在多孔的载体中,包埋成格子型或包埋成微胶囊型 (二)实验流程 1、α-淀粉酶的固定化 吸附 装柱 洗柱 2、淀粉水解作用的检测 溶解淀粉 过柱 检测 3、保存及再次使用 淀粉 糊精 石英砂 反应柱 分布着 小孔的筛板 (注射器) 自行车气门心 α淀粉酶 酶和载体结合不牢固,在使用过程中容易脱落,所以使用受到限制。
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