第二节器皿用具.ppt

* 第二节 器皿用具 一、组培器皿 （一）器皿的类型 培养器皿 分注器 离心管 刻度移液管 细菌过滤器 1．培养器皿 （1）概念 培养器皿---指用于盛放培养基和接种培养材料的器皿。要求透光度好，能耐高压灭菌。 （2）类型 按材料分： 玻璃培养器皿：优点是透光度好、容易清洗；缺点是容易破碎； 塑料培养器皿：优点是不容易破碎、成本较低，但缺点是透光度较玻璃的差、遇火焰易被熔化。 按形状分 试管——特别适合于用少量培养基及试验各种不同配方时选用，在茎尖培养及花药和单子叶植物分化长苗培养时更显方便。有圆底的和平底的两种。 三角瓶——是植物组织培养中最常用的培养器皿，适合于各种培养，固体或液体、大规模或小规模都行。 其优点是：采光好、瓶口较小不易失水和污染。 L形管和T形管——为专用的旋转式液体培养试管。 培养皿——适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。 角形培养瓶和圆形培养瓶——适于液体培养用。 果酱瓶——常用于试管苗大量繁殖，200ml-500ml规格 2．分注器 作用---分装培养基。 分注器可以把配置好的培养基按一定量注入到培养器皿中。一般由4cm-6cm的大型滴管、漏斗、橡皮管及铁夹组成。还有量筒式的分注器，上有刻度，便于控制。微量分注还可采用注射器。 3．离心管 离心管用于离心，将培养的细胞或制备的原生质体从培养基中分离出来，并进行收集。 4．刻度移液管 在配制培养基时，生长调节物质和微量元素等溶液，用量很少，只有用相应刻度的移液管才能准确量取。同时，不同种类的生长调节物质，不能混淆，这就要求专管专用。常用的移液管容量有0.1ml、0.2ml、0.5ml、2ml 、5ml、10ml等。 4．刻度移液管 在配制培养基时，生长调节物质和微量元素等溶液，用量很少，只有用相应刻度的移液管才能准确量取。同时，不同种类的生长调节物质，不能混淆，这就要求专管专用。常用的移液管容量有0.1ml、0.2ml、0.5ml、2ml 、5ml、10ml等。 移液器 5．细菌过滤器 培养基中有些生长调节物质以及有机附加物质如吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GA）等，在高温条件下易被分解破坏，而用细菌过滤器（图1—7）既可除菌又可保持试剂的功效。可用金属制的蔡式漏斗，以石棉滤膜来除去细菌。在过滤少量的液体时，宜用醋酸纤维素和硝酸纤维素混合物制成的微孔滤膜，其孔径为0.45μm。在过滤时需要一套减压吸滤设备（通常使用真空泵），漏斗下接吸滤瓶，吸嘴处接上一只内装脱脂棉的滤气玻璃管。 图1—7 细菌过滤器灭菌装置 （二）器皿的清洗 植物组织培养除了要对待培养的实验材料 和接种用具进行严格消毒外，各种培养器皿也 要求洗涤清洁，以防止带入一些有毒的或影响 培养效果的化学物质或一些微生物等，对那些 常用的玻璃器皿的清洁程度要求更为严格。 1．洗涤剂——清洗玻璃器皿用的洗涤剂主要有肥皂、洗洁精、洗衣粉和铬酸洗涤液（由重铬酸钾和浓硫酸混合而成）。配制铬酸洗涤液的注意事项：（1）在配制时重铬酸钾一定要冷却后才能加浓硫酸，且只能把浓硫酸缓慢加入重铬酸钾溶液中，决不能将重铬酸钾溶液或蒸馏水倒入浓硫酸中。（2）由于铬酸洗涤液具有极强的氧化能力和腐蚀作用，故不要用手直接接触洗涤液。 2．洗涤方法 使用前先用1%稀盐酸浸泡1 夜，然后用肥皂水洗净，清水冲洗，最后用蒸馏水冲淋1遍，干后备用。 已用过的玻璃器皿洗涤方法：去残渣——水洗——热肥皂水（或洗洁精）——水洗——蒸馏水冲洗1次。 较脏的玻璃器皿的洗涤：洗衣粉或洗洁精刷洗几次并冲净——浸入洗涤液中——流水中冲洗——蒸馏水冲洗。 已被霉菌等杂菌污染的玻璃器皿的洗涤： 1210C高温高压蒸汽灭菌30min——趁热倒去残 渣——清水中冲洗——浸泡在浓的重铬酸钾洗 涤液中——2h后取出——水洗数次——蒸馏水 冲淋1次。 用过的吸管和滴管的清洗：洗涤液中浸泡 2h以上——取出在流水中冲洗半小时——蒸馏 水冲淋1次。 用过的载玻片和盖玻片的清洗:洗涤液中浸泡数小时——水洗——绸布擦干——放在95%的洒精中备用。 总之，要求洗净的玻璃器皿应透明发亮，内外壁水膜均匀，不持水珠。 二、器械用具 组织培养所需要的器械用具，可选用医疗器械和微生物实验所用的器具。常用的器械用具如图1—8所示。 镊子 尖头镊子，适用于取植物组织和分离茎尖、叶片表皮等。长20 cm-25cm的枪形镊子，可用于接种和转移植物材料。 剪刀 常用的有解剖剪和弯头剪，一般在转移植株时用。 解剖刀 常用的解剖刀，有长柄和短柄两种。刀片也有双面及单面之分，可以经常更换。对大