鸡白细胞介素2(IL-2)酶联免疫分析.docVIP

鸡白细胞介素2（IL-2） 酶联免疫盒使用说明书 -180 ng/L 使用目的： 本试剂盒用于测定鸡血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素-2（IL-2）含量。 实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定中-2（IL-2）水平。用纯化的-2（IL-2）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入-2（IL-2），再与HRP标记的白细胞介素-2（IL-2）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后底物TMB显色。TMB在酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的-2（IL-2）呈正相关。用酶标仪在nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品-2（IL-2）浓度。 试剂盒组成 标准酶板稀释液稀释液-20℃保存，但应避免反复冻融操作步骤 μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液 90 ng/L 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液 45 ng/L 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液 22.5 ng/L 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液 11.25 ng/L 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻混匀分钟甩干μl，空白孔除外。 μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟。 终止：每孔加终止液50μl，终止反应。450nm波长依序测量各孔的度（OD值）计算以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以，即为样品的实际浓度。 浓洗涤液会有析出，稀释时可在水浴中加温助溶乘以1．；2-8。Chicken Interleukin 2 FOR RESEARCH USE ONLY Assay range：15 ng/L -300 ng/L 96 determinations Purpose This kit allows for the determination of IL-2 concentrations in Chicken serum, cell culture supernates and other biological fluids Principle of the assay The kit assay Chicken IL-2 level in the sample，use Purified antibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then add IL-2 to wells, Combined antibody which With HRP labeled goat anti- chicken become antibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, Add TMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRP enzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acid solution and the color change is measured spectrophotometrically at a wavelength of 450 nm. The concentration of IL-2 in the samples is then determined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve. Materials provided with the kit 1 wash solution 20ml×1bottle 7 Stopp Solution 6ml×1 bottle 2 HRP-Conjugate reagent 6ml×1 bottle 8 Standard（） 0.5ml×1 bottle 3 Microelisa strippla