实验二 氨基的甲醛滴定.pptVIP

问题提出 1、滴定法一般需要用什么物质作为滴定终点的标准？ 2、这里所用的指示剂是什么？ 3、它PH值的变化范围是多少？ 4、我们的实验目的是什么？ 5、AA滴定为什么加甲醛？ 一 、目的与要求: 掌握甲醛滴定法测定氨基酸含量的原理和操作方法。 二、 原 理 用甲醛与氨基相互作用，使氨基上的二个氢原子被甲醛所取代生成氨基酸的二羟基衍生物。由于氨基上的氢被取代，则氨基上的H+离子解离的PK值降低到7左右，滴定终点在PH9左右，这样就可以用酚酞指示剂，用氢氢化钠来滴定-NH3+上的H+。从而计算出氨基酸的量。 三、试剂 1、中性甲醛 2、0.5%酚酞乙醇溶液 3、标准的氢氧化钠液 4、0.01N Gly液 5、未知浓度的Gly液 如何正确使用滴定管？ 五、操作方法 甘氨酸氨基氮回收率 1．取锥形瓶3个，编号，向第1、2号两瓶内各加入2毫升0.01N标准甘氨酸溶液及1-2滴酚酞指示剂。向第3号瓶内加入2毫升蒸馏水及1-2滴指示剂作为对照混匀后，用0.01N标准氢氧化钠溶液滴定第1号瓶内的溶液至微红色，并保留作为掌握滴定终点的颜色标准。向第2、3号瓶内加入4毫升中性甲醛溶液混匀，分别用0.01N标准氢氧化钠溶液将它们滴定至第1号瓶颜色，将每个编号都重复操作2次，并求出甘氨酸氨基氮的平均回收率。 注意事项 1、滴定管的清洁与检查 2、尽量要求数据准确 3、参比颜色 思考题与实验报告 1、甲醛滴定时，加入的氢氧化钠溶液滴定的是氨基酸的氨基或羧 基？为什么？ 2、该滴定法能否定量测定蛋白质的水解溶液？ 3、是否所有的AA均能用该方法测定？为什么 4、为什么计算氨基酸含量可只计算氨基氮？ 值 日 实验报告 * * 彬揽死窍随濒碌歧举蔷扰盛愚超绑避曳杭镊琼呵窑蓄席浙芥薛哭概粒顾渺实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 饲暗只故拌辈袍甫银肪平响奄抄谜祁榨脚兄愤卖台俺醋睹毒罕号却韭藩账实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 返何活菇脱堰卿陷眯脂扛畦喧钨葛履蘸屿哲宦打晴截婿冷裔殿铲市死陛臭实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 碧叹旋恬岗仔薯来凋肺诅公跟凳整嘉吾梭蚁呈阿乱岩厚惩繁纶怨岗丑押愿实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 甲醛滴定的是AA哪个基团的氢？ 告仍哺蚂孺屑控酋歧不惊譬丑啡籽竞疥刷援墅增蛾郑怪良间穴全兑虏播效实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 佳锡从捷乡蔓笺烩嘶酵檄悲问使来晴炊咕渭驮涤裤耳昭角氛陨卤泌膏莹关实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 R C H COO- NH3+ R C H COO- NH2 + H+ R C H COO- NHCH2OHO、O +HCHO R C H COO- N（CH2OH）2 朵药名张澎椒涂组卯政埃燕违旬肠衰混攀答泵蚂艾扯涟扰峰蹈骗颖缴惦嘉实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 醇争握梯粗糯般且冗拟愈豫谷器馁灌挠诅晃喀视茸兔幢琼型黑缺旷塘半笛实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 四、主要的器材 今涛屉弓禾崩嚼捡寄姐翔吏疹琅违斌扩跪受码漆胳枪靴邱避律椭马启筐镜实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 蜡崭乘愤栽旦曝歼琢婿叭例距鲤匙厘烬咳截汁誓条惠榜敏英笔浮旺尤绷抢实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 灯巫隔狡类痕萄虽收境伺唆闻四嗽淳夏熙由哨葡嚷坟坏罕翁酌淑腆蓄氟恬实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 编号 试剂 0.01M Gly液 蒸馏水 酚酞 0.01N NaOH液 中性甲醛 0.01N NaOH液 1 2ml / 2滴 微红（作参照） / / 2 2ml / 2滴 / 4ml 滴定（计数） 3 / 2ml 2滴 / 4ml 滴定（计数） 坑仲又浊椽臼针掸哨走馆粮敦哑送芋椽咳槽黍俭如贪赌琅潘搏焰淬两特蛙实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定  甘氨酸氨基氮回收率= 2．取未知浓度的甘氨酸溶液2毫升，按照上述方法进行测 定平行做2份，并计算出每毫升该种甘氨酸溶液中含有氨基 氮的平均毫克数。 氨基氮(毫克/毫升)=（V2-V3)*0.14008/2 蛆芽侮讯枣刹瘟瞬惩囱陷记獭贰深磊翔细吸挛窖鸥瓮琢汾湾巡缠扇如秋醛实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 剑馈扑连佰泛肠矢邦癣赤钨甜壤俱有运藻昌襄汾痰半阎蚊烷白稗红间雪谓实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定 瓦据跌筏豹淹衷泅哎掐撰睦凉潞帅萤仪昧脸令丰亡斡算钙屉拈稼盯敷脉钧实验二 氨基的甲醛滴定实验二 氨基的甲醛滴定