实验二 外植的灭菌与接种.pptVIP

实验二 外植体的灭菌与接种 一、实验目的 　　通过实验，初步掌握外植体植物材料消毒、接种的无菌操作技术以及外植体愈伤组织诱导和分化的方法。 二、实验原理 植物组织培养是应用无菌操作的方法培养离体的植物器官或组织，甚至单个细胞的过程。 如果组织培养使用的植物材料是带菌的，在接种前就必须选择合适的消毒剂对植物外植体进行表面消毒，获得无菌材料去进行组织培养，这是取得组织培养成功的最基本的前提和重要保证。 植物细胞具有全能性，外植体在合适的培养基上，通过脱分化，形成一种能迅速增殖的无特定结构和功能的细胞团——愈伤组织。 植物生长调节剂是诱导外植体形成愈伤组织和愈伤组织分化的重要影响因素。 消毒目的：通过表面消毒剂杀死植物材料(外植体)表面微生物,同时要尽可能保持植物材料的生命力。 三、实验材料、试剂及器具 (1)材料：烟草叶片 (2)试剂及培养基 10% ＮaClO (全班配2000mL) 75%乙醇 (全班配2000mL,已配) 无菌水 0.1%新洁尔灭 (全班配2000mL，已配) 烟草叶片的培养基(8组) (3)器具：超净工作台、无菌吸水纸、脱脂棉花、标签纸、记号笔、酒精灯、烧杯、镊子、剪刀、解剖刀等 四、操作步骤 培养基、用具灭菌(实验一已完成) 接种注意事项 接种前75%酒精或0.1%新洁尔灭擦手 进入接种室:穿已灭菌工作服, 换拖鞋 接种时尽量不要说话(防