(有机实验报告五.docVIP

华 南 师 范 大 学 实 验 报 告 学生姓名 学 号 专 业 年级、班级 课程名称 近代有机分析实验 11 实验项目 固相微萃取气相色谱法用于挥发性有机化合物混合物的分离分析 实验类型 □验证□设计□综合 实验时间 2012 年 10 月 31日 实验指导老师 实验评分 实验五：固相微萃取气相色谱法用于挥发性有机化合物混合物 的分离分析 一、实验目的 了解固相微萃取及气相色谱仪的基本结构和分离分析的基本原理 了解影响分离效果的因素 掌握定性分析与测定 固相微萃取 (SPME) 是20世纪90年代初发展的一种集萃取、浓缩、解吸于一体的样品前处理技术。其装置类似于一支气相色谱的微量进样器，萃取头是在一根石英纤维上涂上固相微萃取涂层,外套细不锈钢管以保护石英纤维不被折断,纤维头可在钢管内伸缩。将纤维头浸入样品溶液中或顶空气体中一段时间,同时搅拌溶液以加速两相间达到平衡的速度,待平衡后将纤维头取出插入气相色谱汽化室，热解吸涂层上吸附的物质。被萃取物在汽化室内解吸后,靠流动相将其导入色谱柱,完成提取、分离、浓缩的全过程。固相微萃取技术几乎可以用于气体、液体、固体等样品中各类挥发性或半挥发性物质的分析。 仪器：气相色谱仪；全自动空气泵；氮气发生器；氢气发生器；SPB-5毛细管柱30 m×0.32 mm×0.25 μm, 微量注射器；容量瓶；毛细管色谱柱；固相微萃取装置；水浴锅。 试剂：乙醇，正丁醇，乙醇和正丁醇的混合液1、样品及标准溶液的配置：实验室已准备好的乙醇标准溶液、正丁醇标准溶液及乙醇和正丁醇混合的样品溶液 2、开机：依次打开全自动空气泵，氮气发生器，氢气发生器，排出仪器中的剩余空气。等载气稳定后打开氢火焰离子化检测器，最后打开电脑上的工作站。 3、色谱分离条件的设置。 柱箱温度：℃，进样器温度：200 ℃，检测器温度：200 ℃。分流比：。尾吹流30 mL/min，氢气流量 mL /min，空气流量 mL /min。 4、选择“数据采集”—“下载仪器常数”，待柱箱、FID的温度达到设定温度，依次打开氢气，打开火焰，等GC状态显示“准备就绪”后，点击“单次分析”，再点击“样品记录”，保存路径和文件名。 5、点击“开始”，用微量注射器进样，之后按下面板的START，拔出针。依次进样：乙醇标准溶液，正丁醇标准溶液。用固相微萃取装置提取的乙醇和正丁醇混合液的挥发性物质。 将图表复制到WORD文档，打印出来，观察记录的各峰保留时间，确定各个峰的归属，从而达到定性的目的。 关机。 表一 乙醇的色谱数据 峰号 保留时间/min 面积 面积% 1 2.351 5103034.0 100.0000 (2)正丁醇 图二 正丁醇的色谱图 表二 正丁醇的色谱数据 峰号 保留时间/min 面积 面积% 1 3.7445 100.0000 (3)乙醇与正丁醇混合样 图三 乙醇与正丁醇混合样的色谱图 表三 乙醇与正丁醇混合样的色谱数据 峰号 保留时间/min 面积 面积% 分离度 1 2.366 3833550.5 54.5305 -- 2 3.577 3196559.0 45.4695 14.646 六、讨论与结果分析： 1、萃取时间的选择 固相微萃取的萃取头在达到气液平衡的顶空瓶中的放置时间直接关系到对气相中待测组分的萃取量。查阅文献比较不同的萃取时间( 2 min~ 20 min)对萃取效率的影响, 结果表明乙醇和正丁醇的萃取量初始时随萃取时间的增加而不断增加, 5 min 时基本达到稳定。实际测定时, 我们直接选择恒温条件下萃取5 min后进行测定。 2、解吸温度和解吸时间的选择： 乙醇和正丁醇均属于易挥发性化合物, 解吸温度不需要很高。改变气相色谱仪进样口的温度, 即改变解吸温度会对测定结果会产生影响。如果解吸温度过高，对SPME 涂层损害较大； 解吸温度过低，则解吸时间增长, 色谱峰形不对称。实验采用采用200 ℃作为解吸温度。在此解吸温度条件下, 比较了不同解吸时间对测定结果的影响, 结果表明1 min 可基本解吸完全。 3、无机盐效应及PH值影响: 样品中加人无机盐, 可增加样品体系的离子浓度, 使待测物溶解度降低, 从而增加分配系数, 提高萃取效率和分析灵敏度。但过高的盐浓度会增加体系的粘度影响扩散速度, 产生负效应。适当调节体系PH值, 可防止液体试样中待测物质离子化, 使其处于分子状态, 增加亲脂性, 降低溶解度, 提高萃取效率。