农杆菌介导转化拟南芥探析.ppt

实验材料：农杆菌AGL1重组菌株，重组双元表达载体PBI101，拟南芥 试剂： LB液体培养基，Kan（卡那霉素），Rif（利福平）； 转化介质 ：5%蔗糖，0.02% 1.1 简介： 拟南芥（Arabidopsis thaliana）是一种十字花科植物，其作为一重典型的模式植物被广泛用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究。 （1）形态个体小，生活力强,种子量大； （2）生长周期快，从播种到收获种子一般只需6--8周； （3）基因组小(2n=10)，是目前已知植物基因组中最小的，但是 具有完成“复杂”的植物生长发育的所有基因； （4）拟南芥是自花授粉植物，易于获得纯合突变体。 2. 转化原理? 2.1 农杆菌对双子叶植物的创伤部位侵染广泛，在某些条件下对单子叶植物也有一定的感染性。 2.2 根癌农杆菌含有??Ti??(tumor-inducing plasmid)质粒，Ti??质粒上的??T-DNA（transferred DNA）在??Vir区（virulence region）基因产物的作用下可以插入到植物基因组中，诱导在宿主植物中瘤状物的形成。因此，将外源目的基因插入到??T-DNA??中，借助??Ti??质粒的功能，使目的基因转移进宿主植物中并进一步整合、表达。　 2.3 双元表达载体系统 双元表达载体系统主要包括两个部分：