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神经生物学 概念：研究人和动物的神经系统的科学。 特别是脑的结构和功能及其相互关系。 从分子、细胞水平到神经网络乃至整体系统水平对神经系统进行研究。 一、神经生物学发展史 19世纪以前 2000多年前，人们并不认为精神和思维是脑的产物，但哲学家们已开始思考精神的本质，以及精神、灵魂和肉体的关系。 18世纪末，人们认识到，脑可以区分为不同的部位，它们可能行使不同的功能。 20世纪前期 神经解剖学方面：神经元学说- 神经元是神经系统构建的基本单元和信号单位；神经元间突触的概念。 神经生理学方面：揭示了神经元传递信息的电信号和化学信号的双重信号系统。 神经生物学发展趋势 神经活动机制的研究推向细胞和分子水平 微电极细胞内记录和染色技术在单个神经元上把结构和功能紧密地联系了起来。 免疫组织化学方法—把神经元的功能与其神经递质的分析熔为一体。 组织培养、细胞培养—把复杂的神经元回路还原成简单的单元进行分析。 新的电生理技术和分子生物学方法（重组DNA技术等）－神经信号发生、传递的基本单元-离子通道的结构、功能特性及运转方式；神经递质的合成、维持、释放及与受体的相互作用。 脑活动的整合性 神经活动是多侧面的； 活动的研究必须是多层次的：神经系统的活动，不论是感觉、运动，还是脑的高级功能（如学习、记忆、情绪等）都有整体上的表现． 荧光染料法： 主要用作逆向追踪，其优点是可作双标或多标。如核黄标记胞核，固蓝或荧光金标记胞质。 2. 免疫组化法(immunohistochemistry) 用特异性抗体显示组织化学成分的一种方法。免疫组化法的基本步骤有固定、制片、反应三步。常用于显示各种神经肽。 2. 神经递质释放量的测定 1. 电压钳 (voltage clamp) Hodgkin等，20世纪50年代 电压电极、电流电极 反馈放大器 (feedback amplifer) 结合药理学方法（TTX、TEA） 2. 膜片钳 (patch clamp) Neher和Sakmann，1976（nAchR单离子通道电流，1991，Noble ） 可测量单通道离子电流 现在发现：通道的开放和关闭都是突然发生并似乎是全或无式的，开放的持续时间长短不一，但都有恒定的电导值。 (四)生物化学方法 1. 放射免疫法(radioimmunoassay, RIA) 用抗原－抗体反应原理，将抗原标记上放射性同位素，用来测定与此抗原性质相同的物质。RIA包括以下基本步骤：样品采集、加样、反应、分离、测定抗原－抗体复合物的放射性（cpm）, 与标准曲线对照计算待测物质含量。 2.高效液相层析 ( high performance liquid chromatography, HPLC) 利用分子间特异性及可逆性的结合，将其一方固定于层析的固定相中，使流动相中能特异性结合于该分子的物质与其结合，然后再改变条件，使被分离物质洗脱，用一定波长紫外光检测。 HPLC是分离分析生物活性物质和受体的重要手段。 Men ought to know that from nothing else but the brain come joys, delights, laughter and sports, and sorrows, griefs, despondency, and lamentations. And by this, in an especial manner, we acquire wisdom and knowledge, and see and hear and know what are foul and what are fair, what are bad and what are good, what are sweet and what are unsavory …… And by the same organ we become mad and delirious, and fears and terrors assail us …… All these things we endure from the brain when it is not healthy …… In these ways I am of the opinion that the brain exercises the greatest power in the man. --- Hippocrates, On the Sacred Dis