(设计性实验酶的特性.docVIP

酶的特性 实验目的 进一步加深对酶的有关性质的理解，如温度对酶活力的影响、pH对酶活力的影响、酶的活化与抑制及酶的专一性。 （一）温度对酶活力的影响 一．实验原理 酶的催化作用受温度的影响。反应速率随温度的升高而加快。在最适温度下，酶的反应速率最快。温度过高，会使酶的空间的空间结构遭到破坏，使酶永久失活；温度过低时，酶活性很低；但此时酶的空间结构稳定，适当升高温度时，酶活性尚可恢复。 大多数动物酶的最适反应温度为35-40℃，植物酶的最适温度为40-50℃。淀粉与碘作用形成淀粉碘络合物，呈现蓝色。在不同温度下，唾液淀粉酶对淀粉水解活力的高低可根据是否出现蓝色及蓝色的深浅来判断。 二．实验试剂及材料 1.含0.3%NaCl的0.2%淀粉溶液（需新鲜配制） 2.稀释150倍左右的唾液 用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一口蒸馏水，30S后使其流入量筒并稀释150倍左右（稀释倍数可根据自己的唾液酶活性进行调整），混匀备用。 碘化钾-碘溶液 碘化钾20g及碘10g溶于100ml水中，使用前稀释10倍 试管及试管架、水浴锅、白瓷板、胶头滴管、温度计 三．实验操作 步骤 现象 1.选取三只试管，编号，按下表加入试剂并进行操作 混合前试管号 1′ 1′′ 2′ 2′′ 3′ 3′′ 淀粉溶液/mL 1 - 1 - 1 - 稀释唾液/mL 0.5 - 0.5 - - 煮沸过的稀释唾液/mL - - - - - 0.5 分别放入37℃恒温水浴中、冰水中、37℃恒温水浴中保温5min 然后将1′、1′′，2′、2′′，3′、3′′中的溶液分别混合 混合后试管号 1 2 3 混合摇匀后，将1号、3号两试管放入37℃恒温水浴中，2号试管放入冰水中。 2.在各自设定的温度下保温5分钟后取出，将2号管内液体分为两半，在白瓷板上用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。记录并解释结果。 3.将2号管剩下的一半溶液放入37℃恒温水浴中继续保温5分钟后，再在白瓷板上用碘液实验，观察结果。 （二）pH对酶活力的影响 一．实验原理 酶的活性受环境的pH的影响极为显著。pH过高或过低可导致酶高级结构的改变，使酶失活。若其它条件不变，酶在一定的pH范围内才能表现催化活性，且在某一pH下，酶促反应速率最大，此pH称为酶的最适pH。各种酶的最适pH不同，如植物和微生物所含酶的最适pH多在4.5-6.5，动物体内酶的最适pH多在6.5-8.0，当然也有例外，如胃蛋白酶的最适pH为1.5。唾液淀粉酶的最适pH约为6.8。 二．实验试剂及材料 含0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液（需新鲜配制） 2.稀释150倍左右的唾液 3.0.2mol/L磷酸氢二钠溶液 4.0.1mol/L柠檬酸溶液 5.碘化钾-碘溶液 移液管、锥形瓶、滴管、pH试纸:pH5-8范围的试纸、白瓷板、试管 三．实验操作 步骤 现象 1.取4个锥形瓶（50ml），分别标号，制备pH5-8的4种缓冲液：用移液管按下表加入0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液 锥形瓶号 0.2mol/L磷酸氢二钠溶液/mL 0.1mol/L柠檬酸溶液/mL pH值 1 5.15 4.85 5.0 2 6.05 3.95 5.8 3 7.72 2.28 6.8 4 9.72 0.28 8.0 从4个锥形瓶中各取缓冲液3mL，分别加入4支带有标号的试管。再取一支试管编号为5，加入3号锥形瓶中的缓冲溶液3mL，然后向每个试管中各加入0.5%淀粉溶液2mL和稀释的唾液2mL。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为1分钟。将各试管内溶液混匀，并依次置于37℃恒温水浴中保温。 第4管加入唾液2分钟后，每隔1分钟由第5管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小滴碘液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管依次添加1-2滴碘液。以1分钟的间隔，依次向第1至4号试管，添加碘液。 观察各试管内呈现的颜色，分析pH值对唾液淀粉酶活性的影 酶的活化及抑制 一．实验原理 在酶促反应体系中加入某些物质可导致反应速率增加，这些物质称为激活剂。通过改变酶必需基团的化学性质从而引起酶活力降低或丧失的作用称为抑制作用，具有抑制作用的物质称为抑制剂。酶的活性受活化剂或抑制剂的影响，氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。在酶活化剂或者抑制剂的影响下，酶的活性会有不同，因此在加入碘液后，溶液的颜色不同。 二．实验试剂及材料 1.0.1%淀粉溶液 稀释150倍左右的唾液 3.1%NaCl溶液 4.1%Na2SO4溶液 5.1%CuSO4溶液 碘化钾-碘溶液 试管、滴管、白瓷板、水浴锅、温度计 三．实验