实验-常仪器的使用.pptVIP

生物化学与分子生物学实验技术 1.2 生化实验室的基本设施与装备 相对误差（relative error）： 为了反映误差在测量结果中所占的比例，分析工作中经常使用相对误差。相对误差是以真实值的大小为基础表示的误差值，没有单位。 δ/μ=(x-μ)/μ 通常以%，‰ 或 ppm表示。 例如：测定纯NaCl中Cl的百分含量为60.52%，而其真实含量（理论值）为60.66%。则 绝对误差=60.52%?60.66% = -0.14% 相对误差=[（60.52% ? 60.66%） / 60.66% ]×1000 ‰ = -2.3 ‰ 如果不知道真实值，而知道绝对误差值，则相对误差也可以表示为： 相对误差 = δ × 100% x 例如：用分析天平称两个重量，一个是0.0021g，另一个是0.5432g，两个重量的绝对误差都是0.0001g，可是相对误差却大不相同，一个是（1/21 ）×100%，另一个是（1/5432 ）×100%。 可见，由于两个被测组分含量高低不同，即使绝对误差相同，相对误差也不同。对高含量组分测定的相对误差应当要求小些，低含量组分测定的相对误差要求允许大些。 例如：用重量法和滴定法测量样品主要成分，相对误差需要达到千分之一，而用比色法测定样品重微量成分时，相对误差只要求达到百分之几即可。 5.提高分析准确度的方法 五、生物化学常用缓冲液 （一）基本概念 ⑴ Bronsted-Lowry酸碱理论（酸碱质子理论）: 1923年由丹麦化学家J.N.Brφnsted和英国化学家T.M.Lowry同时提出了酸碱质子学说，认为凡能释放质子的分子或离子（如：H2O，HCl，NH4+，HSO4- 等）称为酸，凡能接受质子的分子或离子（如：H2O，NH3，Cl-等）称为碱。因此，一种酸释放质子后即成为碱，称为该酸的共轭碱，同样一种碱与质子结合后，形成对应的酸，称为该碱的共轭酸。 如盐酸在水中的解离： HCl Cl- ＋H+ HCl是酸，Cl-是它的共轭碱。 pH = pKa+log{[质子受体]/[质子供体]} 六、 pH值的测定 第二节 紫外可见分光光度法 3. 影响吸光系数的因素 5. 显示装置: 低档分光光度计现在已都使用数字显示，有的还连有打印机。现代高性能分光光度计均可以连接微机，而且有的主机还使用带液晶或CRT荧屏显示的微处理机和打印绘图机，有的还带有标准软驱，存取数据更加方便。 标准曲线的制作 （1）配置一系列浓度不同的标准溶液。 （2）在测定条件相同的情况下，分别测定其吸光度。 （3）以标准溶液浓度为横坐标（不必考虑显色剂等引起的浓度变化），以相应的吸光度为纵坐标，绘制A-C关系图。 （4）在相同条件下测出样品溶液的吸光度，从标准曲线上查出浓度。 四、减小测定误差的方法 移液器的使用 1 设定移液体积l 从大体积调节到小体积时，为正常调节方法，逆时针旋转刻度即可；l 从小体积调节至大体积时，可先顺时针调至超过设定体积的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证最佳的精确度。2 装配移液器吸头l 单道移液器，将移液端垂直插入吸头，左右微微转动，上紧即可用移液器反复撞击吸头来上紧的方法是不可取的，这样操作会导致移液器部件 因强烈撞击而松散，严重的情况会导致调节刻度的旋钮卡住。l 多道移液器，将移液器的第一道对准第一个吸头，倾斜插入，前后稍许摇动上紧，吸头插入后略超过O型环即可。  养护： 1、如液体不小心进入活塞室应及时清除污染物； 2、移液器使用完毕后，把移液器量程调至最大值，且将移液器垂直放置在移液器架上； 3、根据使用频率所有的移液器应定期用肥皂水清洗或用 60 ％的异丙醇消毒，再用双 蒸水清洗并晾干； 4、避免放在温度较高处以防变形致漏液或不准； 5、发现问题及时找专业人员处理。 ☆ 注意事项 1、当移液器吸嘴有液体时切勿将移液器水平或倒置放置，以防液体流入活塞室腐蚀移液器活塞； 2、正确使用移液器吸液、排液，以达高精准度。尤其注意排液的 2) 、 3) 操作； 3、平时检查是否漏液的方法： 吸液后在液体中停 1-3 秒观