食用菌一级菌种的制作[精选].pptVIP

主要内容： 二、母种的制作流程 * * 食用菌母种的制作技术 作者：刘晓芹 单位：博白县职业中等专业学校 教学目的：使学生学会母种的分离和保存方法 教学重点：母种培养基的制作和组织分离法 教学难点：母种的接种方法 教学方法：多媒体展示讲授与实验相结合 一、什么是母种 二、母种的制作流程 三、母种培养基制作与灭菌 四、母种分离和培养 五、母种的继代培养 六、母种的保存 单击按钮，就能链接到相关内容哦？ 一、什么是母种？ 菌种是食用菌生产的基础，只有优良的菌种才可能有好的收成。菌种一般分为母种、原种或栽培种3级。 无论制作哪一级菌种，关键应强调无菌观念，严格按照无菌技术要求进行操作。 母种：即一级种，是第一次用孢子分离法、组织分离法或基内菌丝获得的纯菌丝体及其经过转管扩大培养得到的菌丝体。 本节主要介绍组织分离法制作母种。 培养基配制 培养基灭菌 菌种分离 菌种培养 转管纯化培养 一级种 一级种 培养基配制 培养基灭菌 培养基配制 培养基配制 培养基配制 培养基配制 培养基配制 培养基配制 三、母种培养基制作与灭菌 1、母种培养基配方： 应根据不同食用菌的不同营养需要配制不同的培养基。常用的配方有： 配方1：土豆葡萄糖琼脂培养基：土豆(即马铃薯)200g、葡萄糖20g、琼脂(凝固剂)20g。 配方2：土豆蔗糖琼脂培养基：土豆200g、琼脂20g、水1000ml、蔗糖20g； 配方3：土豆胡萝卜琼脂培养基：土豆20g、胡萝卜25g、琼脂20g、水1000ml。 配方4：土豆琼脂培养基：土豆250--00g、琼脂20g、水1000ml。 制作马铃薯液 将去皮的马铃薯，切成丝称取200g，加1000ml煮沸20分钟。然后用4层湿纱布过滤，再量取滤液1000ml，不足的应加水补足水分至1 000m 。 融化琼脂 加入琼脂，搅拌使之融化，并加入葡萄糖等可溶性物质，搅匀。 调节PH值 根据不同的菌种需要，用1mol／L NaOH 溶液或盐酸调节好PH值 2、培养基制作： 分装试管 培养基配好后应趁热用分装漏斗进行分装试管，装入试管高度的1/5～1/4，分装时应注意不得使培养基粘在试管的口壁上，以防污染杂菌。 高压灭菌 1、将菌种置于手提式高压灭菌锅内，压强为1.2-1.5kg/cm2g下灭菌25分钟。 摆培养基斜面 2、将灭好菌的培养基趁热取出，摆成30度左右的斜面。 包扎成捆 塞好棉花塞，5-8支包扎成一捆。 四、菌种分离和培养 关键：无菌操作 1、菌种分离设备： 接种室内有接种箱、或超净工作台及相应的接种工具。 注：接种工具要在培养灭菌时用牛皮纸包好置于高压灭菌锅中灭菌，接种室和接种箱用气雾熏蒸剂进行熏蒸消毒，工作人员的手要用75%酒精消毒。 2、什么是组织分离？ 3、组织分离有什么好处？ 菇体组织是菌丝的扭结物，具有很强的再生能力，将它移接在母种培养基上。经过适温培养，即可得到能保持原来菌株性状的母种。因此，用组织分离方法得到的菌丝体，如经过生产实践证明性状优良，即可做母种使用。 所谓组织分离，是指取菇体或耳片一小部分组织进行分离培养菌种的方法。 4、组织分离和接种操作： 选择生长旺盛，强壮的幼菇，用解剖刀在菇盖与菇柄交接处刻一“田”字，，然后靠近火焰旁，用接种针从“田”字中心处钩取一小块菌肉组织，迅速移入培养基斜面中央，抽出接种针，塞上棉塞。如下图 5、菌丝培养： 在25℃下,遮光培养一5-7天,白色粗壮的菌丝即可长满斜面。 注意： 1～2天后，检查有无污染，发现污染及时挑出 6、菌种质量检查： 通过培养，在试管斜面上长出洁白、粗壮的菌丝体，说明接种成功。若在试管斜面上出现有光泽、粘液状培养物或呈黄、绿、灰、黑等毛状物时，即是污染，不能使用。优良菌种的感观应具备“纯、正、壮、润、香”的特点。而菌种生产性能(产量高低、品质优劣、抗逆性强弱)的考核，通常只有根据栽培试验的结果才能得出结论。 “纯”指菌种的纯度高，无感染杂菌，无斑块，无抑制线，无“退菌、断菌”现象。 “正”指菌丝生长无异常，具有亲本正宗的特点。 “壮”指菌丝发育粗壮，长势旺盛，有力。 “润”指菌种含水量适中，无干缩、松散现象。 “香”指具有品种特有的香味，无异味。 *