基础细胞实验必备技能..docxVIP

第三节 实验相关试剂和缓冲液的配制表2.3 1ml细胞裂解液的配制方法组分浓度NaClTris ( pH 8.0 )150 mM50 mMTriton X10 μlAprotininLeupeptin5 μl5 μlPMSF1 mM表2.4 SDS凝胶的配制方法分离胶(8ml)浓缩胶(4ml)Acrylamide concentration30% Acrylamide mix1.5 M Tris pH 8.81 M Tris pH 6.8H2O10% SDS10% Ammonium PersulfateTEMED10%2.67 ml2ml—2.72 ml80 μl80 μl6 μl12%3.2 ml2 ml—2.64 ml80 μl80 μl8 μl4%0.54 ml—0.5 ml1.2 ml40 μl40 μl3 μl表2.5 SDS电泳缓冲液配制方法组分浓度Tris baseGlycineSDS0.025 M0.25 M0.1% (W/V)表2.6 转膜缓冲液的配制方法组分浓度Tris baseGlycineMethanol25 mM0.2 M20%表2.7 TBST漂洗液的配制方法组分浓度NaClTris-HClTween 20150 mM20 mM0.05% (V/V)表2.8 细胞质蛋白提取液的配制方法组分浓度HEPES10 mMMgCl21.5 mMKCl10 mMD