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准性生殖的过程: 接合 (conjugation): 细胞与细胞的直接接触 (由F因子介导) 转导(transduction): 由噬菌体介导 自然遗传转化(natural genetic transfor- mation): 游离DNA分子 + 感受态细胞 “接合” “转导” 及“自然转化”这三种在自然界中存在的细菌遗传重组过程各自的特点: a)外源DNA的来源及进入途径有差异; b)决定因素也各有不同; 如何设计实验对三种途径进行区分? 1.点突变(指DNA顺序上核苷酸发生置换或其它顺序上的改变)的机制:碱基对置换。 包括: 转换:DNA链中嘌呤被嘌呤、嘧啶被嘧啶所置换。 颠换:嘌呤被嘧啶或嘧啶被嘌呤所置换。 发生的原因主要是互变异构。对一种诱变剂来说,可同时产生转换和颠换,或只产生一种。 四种碱基的配对原则(华生Wafson和克里克Crick提出): A一条单链上的嘌呤必须和另一条单链上的嘧啶相配对; B一个6位上是氨基的嘌呤必须和4位上是酮基的嘧啶配对,6位上是酮基的嘌呤必须和4位上是氨基的嘧啶配对,因此A-T、 G-C。 A T(酮式) T(烯醇式) A:T T:A C:G G:C A T C G 双链DNA 单链DNA 碱基对的置换 实线代表转换 虚线代表颠换 转换示意图 嘌呤 嘧啶 嘧啶 嘌呤 嘌呤 嘧啶 ⑴直接与核酸碱基发生化学变化的诱变剂 如硝酸、羟胺和各种烷化剂。以亚硝酸为例: 亚硝酸诱变机制 ⑵通过代谢掺入到DNA分子中,间接引起碱基对转换的诱变剂 这是一些碱基类似物,如5-溴尿嘧啶(5-BU)、5-氨基尿嘧啶(5-AU)、8-氮鸟嘧啶(8-NG)和2-氨基嘌呤(2-AP)等。 以5-溴尿嘧啶(5-BU)为例,它是胸腺嘧啶的代谢类似物。 同理,5-BU的掺入也可引起GC回复到AT(回复突变),而且只对正在代谢和繁殖的微生物起作用,而对休止细胞游离的噬菌体或离体的DNA分子不起作用。 2.移码突变 少数核苷酸的增加或缺失,造成突变点以后的全部遗传密码的转录和翻译发生错误。 丫啶类染料和一类称为ICR(美国肿瘤研究所)类化合物是有效的移码突变的诱变剂。 正常DNA链上的三联密码:|ABC|ABC|ABC|ABC|ABC| 插入一个碱基: |ABC|AB+|CAB|CAB|CAB| 缺失一个碱基: |ABC|BCA|BCA|BCA|BCA| 插入一个缺失一个碱基: |ABC|AB+|CAB|CAC|ABC| 加进三个碱基: |ABC| +AB|CAB|+CA|BC+| ABC|ABC| 3.染色体畸变 某些理化因子如X射线和亚硝酸等除了引起点突变外,还会产生DNA的大损伤,即染色体的倒位、易位、缺失和重复。使遗传信息发生改变: CGG精氨酸 同义突变 CGA CAA谷氨酸 错义突变 精氨酸 GGA甘氨酸 错义突变 UGA终止 无义突变 自发突变是指某些微生物在没有人工参与下所发生的那些突变。 1.多因素低剂量的诱变效应 如宇宙间的短波辐射、自然界中普遍存在的一些低浓度诱变物质的作用等。 2.微生物自身代谢产物的诱变 过氧化氢是微生物的一种正常代谢产物。它对脉胞霉具诱变作用。 3.互变异构效应 4.环出效应 (二)自发突变的机制 基因重组gene recombination 两个不同来源的遗传物质进行交换,经过基因重新组合,形成新的基因型的过程。 原核微生物没有有性生殖,其基因重组通过转化、接合、转导方式进行。 第三节 细菌基因转移和重组 接合作用:指供体菌和受体菌的完整细胞经直接接触而传递大段DNA(包括质粒)遗传信息的现象(美国科学工作者莱德伯格和塔图姆1946年发现)。 一、细菌的接合作用 1.实验证据 1946年,Joshua Lederberg 和Edward L.Taturm细菌的多重营养缺陷型杂交实验 中间平板上长出的原养型菌落是两菌株之间发生了遗传交换和重组所致! 证实接合过程需要细胞间的直接接触的“U”型管实验( Bernard Davis,1950 ) 大肠杆菌的接合
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