转氨酶、硝态氮、铵态氮等测定方.docVIP

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  • 2017-01-28 发布于湖北
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六、 氮含量的测定:(2g) 样品提取液的提取: 称取新鲜植物组织2g,加入15ml无离子水研磨成匀浆,置于45℃振荡机中摇动浸提lh后用5ml无离子水冲洗干净,然后离心或过滤(如含色素需用活性炭脱色),滤液备用。 ? 1硝态氮的测定: 标准氮试剂:精称KNO3 0.9021g,溶于少量重蒸无离子水中,并定容至250ml,含N 量为500μgNO3一N/ml。 5%水杨酸一硫酸溶液:称取水杨酸5g,溶于100ml浓H2SO4(比重1.84)中,搅拌溶解后贮于棕色瓶内,冰箱中至多保存l周,最好现用现配。 ?2mol/L NaOH溶液:称取NaOH 80g放入500ml硬质烧杯中,加入重蒸无离子水200ml,溶解后定容至l000ml。 操作方法 标准曲线制作取:50ml容量瓶6只(编号),依次加入标准氮试剂5、l0、l5、20、25、30ml,用无离子水定容,则成为50、100、l50、200、250、300 ug/ml的氮系列标准溶液;再取干沽50ml三角瓶7只,分别装入上述系列溶液0.2ml,剩下的1只三角瓶加入无离水0.2ml(作为O 点);然后分别加入5%水杨酸一硫酸溶液0.8ml,混匀静置20--30min(显色);最后加入2mol/L NaOH溶液l9ml,混匀。冷却后利用751分光光度计,于410nm下比色,记录光密度(OD)值;并以OD 值为纵座标,以标准氮(0、50、

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