* 克隆的荧光小猪(左)和正常小猪(右) 克隆马及其“母亲兼姐姐” 卵供体绵羊 去核 去核卵母细胞 电击融合 乳腺上皮细胞核导入去核卵细胞 移植入一只绵羊输卵管中 再次植入合适绵羊体内 核供体克隆 核供体绵羊 乳腺组织 乳腺上皮细胞 进入G0期 取出发育良好胚胎 150天后出生小绵羊 克隆绵羊 Dolly 制作过程 基本条件: 克隆的条件 潜能:细胞具有的发育完整性。 具有包含物种完整基因组的细胞核的活细胞 能有效调控细胞核发育的细胞质物质 完成胚胎发育的必要的环境条件 一、动物细胞培养和克隆形成 (一)动物细胞、组织培养 1.动物 细胞 培养 从动物体取出一部分组织 机械消化或胰酶消化 分散成单个细胞 一定条件下培养 细胞生存、生长、分裂、 衰老、死亡;保持接触抑制 胰酶 处理 细胞 培养 一、动物细胞培养和克隆形成 (一)细胞系、细胞株 原代培养 传代培养 ………… 原代培养物 细胞系 原代培养物在首次 传代时就成为细胞系 可连 续培 养的 连续 细胞系 不能连续培养的 有限 细胞系 一、动物细胞培养和克隆形成 (一)细胞系、细胞株 细胞株: 通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞,称为细胞株。 细胞株一般具有恒定的染色体组型、同工酶类型、 病毒敏感性和生化特性
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