08_外源化学物致癌作用精品课件.ppt

思考题 1.试述化学致癌的三个阶段。 2.试述化学致癌的机制。 3.要判断一个化学物质是否具有致癌性，如何设计实验？ * * 1.确证的人类致癌物必须有 A．人类流行病学及动物致癌实验方面充分的证据 B．经动物实验及流行病学调查研究，并有一定的线索 C．充分流行病学调查研究的结果 D．已建立了动物模型 2.关于癌症病因，下述哪一项描述是错误的 A．癌症是由多种病因诱变的 B．机体发生癌症的内在原因有遗传因素 C．人类癌症90％与环境因素有关，其中主要是辐射致癌和病毒致癌 D．人类癌症90％与环境因素有关，其中主要是化学因素致癌 * * 3.下述哪一过程不是致癌作用的三个阶段： A．突变 B．引发 C．促进 D．进展 4.判别化学物质致癌性所使用的系统不包括： A．一般毒性试验 B．短期试验 C．动物诱癌试验 C．人类流行病学研究 * * （二）细胞恶性转化试验 细胞恶性转化试验：是指受试物与正常细胞在体外接触，如有致癌作用，可使正常细胞形态、功能发生变化，发生与癌细胞相似的过程。 体外培养细胞观察内容：细胞生长自控能力、增殖速度、细胞形态、生化表型以及移植于动物体内形成肿瘤的能力等。 * * 原理：癌细胞与正常细胞的不同是其核型的改变和因此而导致的生长自控能力的丧失。 细胞自控能力丧失可能导致细胞在离体培养时生长特性改变。 正常细胞：在液体培养时，克隆中的细胞排列有序、只能生长成单层； 癌细胞：贴壁生长的克隆失去接触抑制的能力，因而形成的“恶性转化”克隆中的细胞排列杂乱，重叠生长。 判断是否出现了细胞的恶变，须将转化的细胞植入试验动物体内，观察转化的细胞是否可发展成肿瘤。 * * 恶变的细胞表现 细胞偏大，且大小不等； 核大而畸形，染色质深染而粗糙，核浆比例倒置，核膜粗厚，核仁增生而肥大； 核仁核胞浆因RNA增多而偏酸性，呈嗜碱性染色而偏蓝； 多见核分裂现象； 正常的接触抑制消失，它的克隆是多层细胞且排列紊乱； 生长表型改变。 * * 常用的细胞种类 细胞选择的主要原则： 1、体外容易培养和传代，阴性细胞克隆背景较低； 2、细胞自发突变率低，或自发转化能力很弱； 3、已获得无限生长能力，但仍保持接触抑制而无致 肿瘤性。 * * 原代细胞：如SHE细胞、人类成纤维细胞、小鼠皮肤或大鼠支气管上皮细胞等； 细胞系：BALB/C-3T3，C3H10T1/2，BHK-21； 病毒感染细胞：如RLV/RE细胞（劳舍尔白血病病毒感染的Fisher大鼠胚胎细胞）和SA7/SHE细胞（猿猴腺病毒感染的SHE细胞）。 * * 优点：试验周期短，经济方便；一个细胞克隆或细胞巢就相当于一只受试物；受试物直接与靶细胞作用，便于控制剂量，不受吸收、代谢、分布的影响，并且可不受体内免疫系统等干扰；便于观察。 缺点：仍存在假阳性、假阴性等问题。 * * （一）哺乳动物短期致癌试验 ?小鼠肺肿瘤诱发试验 ?大鼠肝转变灶诱发试验 ?小鼠皮肤肿瘤诱发试验 ?雌性大鼠乳腺癌诱发试验 二、动物致癌试验 * * 上述任一试验的阳性结果，其意义与长期动物致癌试验相当；但因试验期短、靶器官局限、适用化学物质类型较少，阴性结果意义不大。 * * （二）哺乳动物长期致癌试验 ?化学致癌物最大的特点是有一个较长的潜伏期，对于一个新化学物的致癌性评价，不可能也不容许等到数十年后才取得人肿瘤流行病调查资料方作出判断。动物致癌试验只需相对较短的时间，对动物进行终生染毒，即可取得资料。 ?可严格控制受试物进入机体的途径、剂量及动物的生活环境，从而排除其他因素对试验结果的干扰。 * * （一）动物选择 种属 ：对肿瘤的感受性，特别是对受检物有特定的靶器官尤为重要。 品系：①已知对相似化学结构的物质敏感。②肿瘤自发率低。③代谢转化速率和方式与人相似。 性别：一般是雌雄各半，特殊情况用单性。 年龄：一般用刚断乳或断乳不久的幼年动物，因为此时动物的感受性高，同时也可以使试验接触时间更长。 动物数量：每剂量组不少于雌雄各50只，希望在出现第一个肿瘤时，每组还有不少于25只动物。当对照组肿瘤自发率较高，而染毒组肿瘤发生率较低时，所需动物数增加。 * * * * （二）剂量设计 3个染毒剂量组 ?低剂量组——无作用剂量组，不产生任何毒性效应 ?中剂量组——阈剂量组 ?高剂量组——发生肿瘤剂量组 1个对照组（必要时另设一个溶剂对照组） 注：为使染毒组肿瘤的发生率显著高于阴性对照组，在设计剂量时应考虑使用尽可能大的量，使试验不至于漏检具有阳性致癌作用的物质。 * * （三）