第二章 核酸的结构与功能素材.pptVIP

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  • 2017-01-29 发布于湖北
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m i R N A与肿瘤研究 分子杂交种类 (1)Southern blotting: DNA/DNA的杂交,用于检测DNA的技术; (2)Northern blotting: RNA/DNA的杂交,用于检测RNA的技术; (3)Western blotting: 蛋白质/蛋白质的杂交,用于检测蛋白质的技术。 (1)Southern杂交 ①Southern杂交的原理 将基因组DNA用限制酶进行酶解,酶解片段经琼脂糖凝胶电泳进行分离,然后用碱使分离的DNA变性,并将变性的DNA片段转移到尼龙膜上,经固定后加入标记的核酸探针进行杂交反应,在与探针有同源序列的固相DNA的位置上显示出杂交信号。 探针:为已知的核酸片段,用放射性同位素或酶进行了标记,随后可以检测到。 (2)、Southern杂交的基本过程 思考题 1、转苏云金芽胞杆菌的Bt毒蛋白基因的抗虫棉占我国棉花种植面积的一半以上,请问用什么方法可以鉴定某一棉花植株是否为转Bt毒蛋白基因的棉花? (1)、基因组DNA的提取与酶切 将基因组DNA切割成大小不等的片段 基因组DNA酶切产物的电泳分离 (2)、消化产物的琼脂糖凝胶电泳 (3)、DNA原位变性 琼脂糖凝胶 尼龙膜 毛细转移装置 buffer 滤纸 支持物 吸水纸 玻璃板 重物 (4)、DNA从琼脂糖凝胶转移到固相支持物 尼龙膜 * 第二章 核酸的

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