魔芋精粉中葡甘露聚糖含量的测定;开放性化学实验探索..docVIP

第 26 卷第 3 期 摇 摇 大学化学 Vol. 26 No. 3 摇 摇 2011 年 6 月 UNIVERSITY CHEMISTRY Jun. 2011 魔芋精粉中葡甘露聚糖含量的测定 ———开放性化学实验探索 徐瑜摇 徐伟明摇 周晶 (杭州师范大学材料与化学化工学院浙江杭州摇 310036) 摇 摇 摘要摇 以魔芋精粉中葡甘露聚糖含量的测定为例,为学生开设开放性实验,使学生巩固理论知识,激发学 习兴趣,提高实验操作技能,进一步提高科研创新能力和综合能力。 摇 摇 关键词摇 开放性实验摇 魔芋摇 葡甘露聚糖摇 含量测定 摇 摇 开放性实验[1鄄2] 可以使实验室教学资源得到充分利用,学生可以运用所学的化学知识,结合实际,自 己设计课题,采用合作学习的方式解决问题。 开放性实验能使学生得到自主探索研究的机会,对于提高 学生综合素质、培养创新意识和实践能力很有意义。 摇 摇 我们选择了一个有教学意义、难度适宜的课题———魔芋精粉中葡甘露聚糖含量的测定,作为开放性 化学实验,对我校化学类专业学生开设。 该实验涉及有机化学、高分子化学、分析化学、仪器分析等课程 知识以及实验操作的综合应用。 1摇 课题背景知识介绍 摇 摇 魔芋是一种草本植物,是我国的特产,广泛分布于长江流域。 魔芋球茎中含有葡甘露聚糖(KGM)、 淀粉、生物碱、纤维素和矿物质等营养成分,其中 KGM 是一种优良的低热量、低脂肪、高纤维素的水溶 性膳食纤维。 许多研究表明,KGM 具有降血糖、降血脂及逆转脂肪肝、通便减肥、抗癌、增强免疫功能、 抗衰老等[3] 保健作用和医疗功效。 魔芋葡甘露聚糖有独特的理化性质和一些优良的特性,如强吸水 性、可食用性、流变性、增稠性、凝胶性和成膜性,在制药工业、日用化学工业、造纸工业等领域有广泛的 应用。 摇 摇 魔芋葡甘露聚糖是已知植物胶中黏度最大的天然高分子多糖,其分子式为( C6 H10 O6 ) n 。 对 KGM 化学结构研究的有关报道很多,但其确切结构至今尚无定论,奥山典生等人推测它的结构如图 1 所示。  图 1摇 KGM 的推测结构  [5鄄6] 摇 第 3 期 徐瑜等:魔芋精粉中葡甘露聚糖含量的测定———开放性化学实验探索 59 2摇 实验方案设计 摇 摇 有多种用于评价魔芋精粉和相应产品质量的方法;KGM 含量是评价的关键指标。 KGM 含量的测 定方法有很多种,有费林滴定法、3,5鄄二硝基水杨酸法(DNS 法)、甘露糖胶重量法、苯酚比色法、旋转黏 度法、薄层色谱法、气相色谱法[4] 和高效液相色谱法,每种方法都有各自的优缺点。 根据这一情况,可 让学生查找相关文献,根据自己的知识水平和兴趣,选择一种或几种测定方法进行实验,并对实验结果 进行分析和比较;然后采用小组讨论的形式探讨是否可行;再由教师把关,逐一进行评价;最后制定出最 佳实验方案。 这一过程有助于开阔学生的思维,培养学生比较辨别的能力。 高年级的学生还可对所用 测定方法中不同因素对实验结果的作用和影响进行分析和评价。 2. 1摇 实验前准备工作 摇 摇 学生选择某种测定方法后,根据文献准备实验用化学药品、试剂和仪器,其中遇到如气相色谱仪、液 相色谱仪、紫外可见分光光度计等大型仪器时,还需进一步学习和巩固这些仪器的实验原理和操作方 法。 2. 2摇 样品的预处理 摇 摇 样品的预处理即 KGM 的提取方法有好几种:酸性冷溶法、酶解法、沸水溶解法、乙醇沉淀法、超声 波提取法、甲酸鄄氢氧化钠缓冲液溶胀法等。 每种提取方法都有自己的优缺点,学生可以根据实验室条 件和实验时间选择感兴趣的方法。 2. 3摇 实验操作 摇 摇 选择好样品测定方法和预处理方式后进行实验操作。 2. 3. 1摇 3,5鄄二硝基水杨酸法( DNS 法) 摇 摇 选择甲酸鄄氢氧化钠缓冲液溶胀法提取 KGM,制作标准葡萄糖工作液的曲线,确定最大吸收波长, 制备 KGM 水解液,选择一定的显色时间、DNS 添加量、水解酸度和水解时间等因素进行检测,按下式算 出 KGM 的含量: 摇 摇 摇 摇 w (KGM) = 着 伊 (5 T样 - T白 ) 伊 50 m 摇 摇 式中 w(KGM)为 KGM 的质量分数( 下同);着 为甘露糖和葡萄糖在葡甘露聚糖分子中的残基分子 量与葡甘露聚糖水解后得到的甘露糖和葡萄糖相对分子质量之比;T样 为水解液的吸光度值;T白 为空白 样的吸光度值;m 为魔芋粉样品质量。 2. 3. 2摇 高效液相色谱法[7] 摇 摇 选择超声波提取法来提取 KGM,制作含葡萄