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- 2017-01-29 发布于重庆
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毕赤酵母的培养基1.
毕赤酵母的培养
巴斯德毕赤酵母是甲醇营养型酵母中的一类能够利用甲醇作为唯一碳源和能源的酵母菌。与其它酵母一样,在无性生长期主要以单倍体形式存在,当环境营养限制时,常诱导2个生理类型不同的接合型单倍体细胞交配,融合成双倍体。
比赤酵母表达常用的培养基:
1 LB培养基 胰蛋白胨 1% 酵母粉 0.5% 氯化钠 1% PH 7.0大肠杆菌培养
制作平板加入2%的琼脂粉,121摄氏度20分钟,可于室温保存。 用于培养 pPICZ αA 原核宿主菌 TOP10F’时可加入 Zeocin 25ug / mL(博来霉素,抗菌素)
宿主细胞His- 诱变造成的。
MD酵母转化筛选培养基(营养缺陷型His-)13.4g/L酵母基本氮源;0.4mg/L生物素;20g/L葡萄糖用于表达的毕赤酵母都属于组氨酸缺陷型的只有染色体上成功整合入重组质粒载体基因的毕赤酵母菌株才能在组氨酸缺失的MD培养基生长,以此筛选出重组子。
MM酵母转化进一步筛选培养基仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基,成为基本培养基(minimal medium,MM),有时用符号“[ - ]”来表示。不同微生物的基本培养基是不相同的。
2 LLB 培养基 胰蛋白胨 1% 酵母粉 0.5% 氯化钠 0.5% PH 7.0制作平板时加入 2%琼脂粉。 121℃高压灭菌 20min。
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