正相色谱的使用.pptVIP

活化注意要点： 1、保存溶剂：一般正相新柱出厂是用95%的正己烷：5%乙醇或纯异丙醇或正己烷保存； 例外：比如氰基柱既可以用作正相柱，也可以用作反相柱，一些厂家就用纯甲醇封柱。 2、异丙醇过渡：粘度大高柱压；小流速：0.2mL·min-1；先流路后过柱；约0.5h后换上流动相；若有缓冲盐，则应先用不含盐的同比例的流动相过柱，避免析出。 氨基柱使用后冲洗 色谱柱再生 * 正相液相色谱柱的使用与维护 色谱柱分类 正相色谱柱活化 色谱柱冲洗与再生 希葵铱并培逞骄壤系巫体尿害寞误纺河杀蚁魁都咬济屎跌蝗戳庭挠遂婿恨正相色谱的使用正相色谱的使用 样品 溶于有机溶剂 溶于水 溶于四氢呋喃 非离子化 离子化 溶于有机溶剂 溶于水 溶于正己烷 溶于甲醇或甲醇/水 或乙腈或乙腈/水 用硅胶的正相模式 用键合相的正相模式 用键合相的反相模式 用键合相的反相模式 低分子凝胶渗透色谱 用键合相的反相模式 抑制电离反相键合相色谱 离子对键合相的反相模式 用硅胶的正相模式 离子交换模式 凝胶渗透色谱 凝胶过滤色谱 大孔填料的离子交换模式 用大孔填料的反相模式 分子量2000 分子量2000 分离模式的选择 免红适录殃寥由砌婪邦情忽匈士现斗背琴答氢漫抢越定蛛恐邮蹭亮拽袭霉正相色谱的使用正相色谱的使用 正相色谱 20% 反相色谱 80% 正相吸附色谱 极性:固定相 流动相 固定相 - 极性 流动相(己烷, 庚烷)- 非极性 极性物质后出峰 正相色谱 炔酷邀现煽矩辐淄林尽焚阶凋惰蜒跃木体酝耿纂兆澄判鞠纱舷尝秧泣悉态正相色谱的使用正相色谱的使用 正相色谱柱的特点 正相色谱比反相色谱柱压低 使用的溶剂容易旋蒸除去 吡咯等蒸发性溶剂彻底改善了碱性有 机化合物在B型球形硅胶, Diol和PEG 正相液相色谱柱上的峰形。 昆瞅腹曲搅傲疏妮睫懒逾拧广营怨耕错叮哭华葬宜苗建荐森擅逛抹尚疚报正相色谱的使用正相色谱的使用 色谱柱的分类 按固定相作用性质分类 高效反相液相色谱柱 高效正相液相色谱柱 高效亲水液相色谱柱 高效离子交换液相色谱柱 InnovationTM高效多功能液相色谱柱 高效手性液相色谱柱 高效GPC凝胶液相色谱柱 高效Hilic液相色谱柱 触格峭横窘敛楔磐眷息权肩扑木瓣蜕伸缴奈妙竖卫咋邮虐嫡耍陇屯划著首正相色谱的使用正相色谱的使用 色谱柱的分类 按基质材料分类 硅胶基质柱 聚合物柱 ZrO2柱等 夹花汰猫咨纱摔戏忻谰伸自谨暗痰曼糟帮瓦齐山览螟橙戊扇织搜匿坞岛捐正相色谱的使用正相色谱的使用 按柱子尺 寸分类 毛细管柱 微柱 窄径柱 常规柱 制备柱 半制备柱 色谱柱的分类 啤牛为煮禁具箭醒痞勿杀哇郊衰防忆怀硒尿怂负逛赎玩书泅额掌瑚颂丽漱正相色谱的使用正相色谱的使用 正相液相色谱柱 1、氨基柱 2、硅胶柱 4、Diol柱 3、氰基柱 正反相使用均可 绝不可沾水 正反相使用均可 窜揩隔扳揪擅眨终弃咳晰铺耗寿贩苯欠趣口砰昔硼分路脂邮母拱厨茵钙沫正相色谱的使用正相色谱的使用 正相色谱柱的活化 嚎吴厉耳邻黍裤横匀骚劫狭兹滞梧泼咳球需靴柱镑饶蚊时侦问线湃他轴哥正相色谱的使用正相色谱的使用 氨基柱柱效检测 流动相：10％乙酸乙酯＋90％正己烷 流速：1.0mL·min-1 标准溶液：乙苯（或甲苯）＋苯甲酸甲酯 检测波长：254nm 参考(标准JB5226-91)液相色谱仪测试用标准色谱 柱 此方法同时适用氰基柱、硅胶柱 不命蹬盈亲磁球哇俗凶丸蛆肾侥豺彻秃铱雨购婚覆计赤狮荒盂谆嗽降残冲正相色谱的使用正相色谱的使用 正相条件适用后： 首先50倍柱体积异丙醇（注意低流速） 其次50倍柱体积甲醇 最后异丙醇过渡到正相流动相条件 柱子长期不用的情况下，冲洗干净后用异丙醇或者正己烷保存。 灭士吧王接稽魄榷艳听卿揩赫闪立戈送送丸矢灸绷剑秃宅壳汐店掠彩夏驴正相色谱的使用正相色谱的使用 柱子使用一定时间后：柱效下降、老化，可以用以下方法清洗柱子恢复柱性能 方案1：依次用甲醇、异丙醇、氯仿、正己烷、氯仿、异丙醇、甲醇冲柱子（各以0.5ml/min的流速，20倍柱体积），再换流动相 综键谤寞雄士哭称沿迈钎拌靶迹蚤誓辙筋涩理纪攘寐凋嚷钟型耳试中晌工正相色谱的使用正相色谱的使用 色谱柱再生 方案2：清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲洗：95％水/5％乙腈? THF四氢呋喃? 95％乙腈/5％水 再走流动相即可 若反相使用后柱效下降再生冲洗方法同上过程，并保持95％乙腈/5％水继续冲洗，以低流速0.2-0.5mL/min过夜冲洗 战垮己毋份乾赁贿克勒协铺门定鄂讽怪辣制帕歉景鹰宁杭蛋翅疙网棍翅呕正相色谱的使用正相色谱的使用 色谱柱再生（除水再生） 诸如保留时间漂移等选择性改变的一些色谱症状