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系统性红斑狼疮患者外周血t淋巴细胞亚群的变化
系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞亚群的变化
【摘要】 目的:研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞亚群变化及其临床意义。方法:对30例患者和20例健康者,采用特异性荧光抗体标记,流式细胞检测T淋巴细胞亚群的变化。结果:SLE活动组CD4+细胞数明显降低(Plt;0.05);CD4+/CD8+比值明显降低(Plt;0.05)。结论:T淋巴细胞亚群在SLE的发病机制中起重要作用。
【关键词】 系统性红斑狼疮;T淋巴细胞亚群;流式细胞术
The Change of Peripheral Blood T Lymphocyte Subsets in Patients with Different Clinical Types of Systemic Lupus Erythematosus
Abstract: Objective To study the change of T lymhocyte subsets with systemic lupus erythematosus. Methods 30 patients with systemic lupus erythematosus and 20 cases of healthy subjects were investigated and the change of T Lymphocyte subsets were counted by flow cytometer. Results Decrease in CD4+ cells and was observed in SLE patients(Plt;0.05). Conclusion T lymphocyte isplay an important role in the development of SLE.
Key words: Systemic lupus erythematosus; T lymphocyte; Flow cytomety
系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫性疾病,存在免疫功能的紊乱,但其发病机制及机体内免疫调节细胞的具体变化尚未完全明确。本研究采用特异性荧光抗体标记流式细胞术,探讨SLE患者在疾病的不同阶段外周血CD3+、CD4+、CD8+淋巴细胞的变化,为阐述SLE患者存在的免疫功能紊乱、揭示SLE的发病机制提供实验依据。
1 资料与方法
1.1 临床资料
SLE患者30例,其中女29例,男1例,年龄17岁~54岁,平均年龄31.8岁,所有病例均符合1982年美国风湿病学会(ARA)修订的SLE诊断标准[1]。采用1992年欧洲SLE活动性评分标准判断SLE的病情活动性[2]。其中活动期SLE 18例(活动期患者未用糖皮质激素),非活动期SLE 12例,正常对照组为20例健康志愿者。
1.2 主要试剂和仪器
双色标记单抗CD3+、CD4+分别与FITC、PE荧光素结合;含beads的TrueCount管;CaliBRITEbeads;FACS溶血素(均为美国BD公司产品)。FACS Calibur流式细胞仪(美国BD公司)。
1.3 实验方法
标本处理:抽患者外周血2 ml,用肝素钠抗凝管保存,6 h内分析;向TrueCount管中分别加入20 μl抗体和50 μl的抗凝全血,振荡混匀3 s,避光放置15 min;加入FACS(1X)溶血素2 ml,充分混匀,室温避光10 min;1 000 rpm/min离心5 min,弃上清;加入2 ml PBS洗一次;800 rpm/min离心5 min,弃上清;流式细胞仪上机检测。数据获取与分析使用CaliBRITE标准微球、FACSComp软件调节FACS Calibur流式细胞仪PMT电压、荧光补偿、灵敏度,应用SimulSET分析软件对处理好的标本进行CD3+、CD4+、CD8+相对计数。
1.4 统计学分析
采用SPSS 8.0统计软件,所有数据以均数标±准差(±s)表示,组间比较采用t检验进行数据分析。
2 结果
SLE患者外周血T细胞亚群检测结果见表1,SLE活动期患者与正常组比较CD4+细胞数明显降低(Plt;0.05);CD4+/CD8+比值降低(Plt;0.05)。SLE活动期患者与正常组比CD8+细胞数差异无显著性(Pgt;0.05)。表1 SLE患者与正常人T淋巴细胞亚群比较(略)注:*与正常对照组比较,Plt;0.05;Δ与正常对照组比较,Pgt;0.05。 3 讨论
正常免疫应答过程有依赖于各种免疫细胞,特别是各T细胞亚群之间的相互协作和相互制约。若某一T细胞亚群的
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