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【优化方案】2014届高考生物二轮复习专题讲解练 专题九 现代生物技术第1讲 基因工程和细胞工程
考纲要求 三年考情 命题趋势 1.基因工程的诞生
2.基因工程的原理及技术
3.基因工程的应用
4.蛋白质工程 2013全国大纲、广东、江苏、安徽、四川、福建、全国
2012全国新课标、山东、江苏、福建、天津、浙江、安徽
2011浙江、海南、山东、江苏、安徽、福建、北京 1.趋势分析:(1)多以最新基因工程研究成果为载体,考查基因工程的工具与操作程序。
(2)以工农业生产、畜牧业生产和医学实践中的具体事例为命题背景,考查植物组织培养相关知识。
2.备考指南:(1)表解比较法理解限制酶、DNA连接酶和载体的作用。
(2)实例分析法理解基因工程的原理与过程。
(3)列表比较法理解两个不同:植物组织培养和动物细胞培养的不同、植物体细胞杂交与动物细胞融合的不同。
(4)图解法理解单克隆抗体的制备过程。 植物的组织培养 2013重庆、全国大纲、全国、天津 2012浙江 2011江苏 1.动物的细胞培养与体细胞克隆
2.细胞融合与单克隆抗体 2013重庆、全国大纲、山东
2012山东、福建、安徽
2011江苏、安徽
,
1.基因工程和克隆技术涉及哪些工具酶?
2.转基因动物的培育涉及到哪些生物工程?
考点一 基因工程
图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点,ampr表示氨苄青霉素抗性基因,neo表示新霉素抗性基因。下列叙述正确的是( )
A.图甲中的质粒用BamH 切割后,含有4个游离的磷酸基团
B.在构建重组质粒时,可用Pst 和BamH 切割质粒和外源DNA
C.用Pst 和Hind 酶切,加入DNA连接酶后可得到1种符合要求的重组质粒
D.导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长
[自主尝试] ________
【链接提升】
1.限制酶切割时的注意事项
(1)注意切割的序列是否会连接成环:切割图1中的目的基因时,最好不要只用BamH ,因为只用BamH 切割时,目的基因的两端具有相同的黏性末端,易自行连接成环,因此最好同时用BamH 和Hind 切割。
(2)限制酶的切割序列具有包含关系:图2中BamH 和Mbo 识别的碱基序列和酶切位点分别是G↓GATCC、↓GATC,这两个限制酶都可切割同一碱基序列GGATCC。
(3)切割时注意是否破坏所有抗性基因,导致缺乏标记基因。
2.基因工程的操作步骤
(1)目的基因的获取
(2)基因表达载体的构建:
组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因。
构建过程:
(3)将目的基因导入受体细胞 植物细胞 动物细胞 微生物细胞 常用方法 农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法 显微注射技术 感受态细胞法(用Ca2+处理) 受体细胞 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞
(4)目的基因的检测与鉴定:
跟踪训练 某质粒上有Sal 、Hind 、BamH 三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如图所示,请回答下列问题。
(1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状,这种新性状(变异性状)的来源属于________________________________________________________________________。
(2)如果将抗盐基因直接导入烟草细胞,一般情况下,烟草不会具有抗盐特性,原因是抗盐基因在烟草细胞中不能________,也不能________。
(3)在构建重组质粒时,应选用________和________两种酶对____________和____________进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。
(4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。
培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有______________、______________。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是________菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________________作探针进行分子杂交检测,又要用______________________________的方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。
(5)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用________________技术,愈伤组织经______________进而形成完整植株,此过程除营养物质外还必须向培养基中添加________________。
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