(蔬菜农残仪检测技术和检测注意事项.docxVIP

蔬菜农残仪检测技术和检测注意事项托普云农农残仪检测原理; 农残速测仪检测原理是采用酶抑制法，在一定条件下。有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制胆碱酯酶的活性，其抑制率与农药的浓度星正相关11-21。在正常情况下，酶催化代谢产物水解．其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在410am处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率的大小可以判断样品中是否有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。农残速测方法2．1试剂配制与保存2．1．1缓冲液。用量筒量取500mL蒸馏水，先用少量(100一150 mL)的蒸馏水缓缓倒入放有缓冲nbsp;nbsp; 剂干粉的量杯中，用玻棒搅拌至完全溶解后将量筒中剩余的蒸馏水倒人量杯中充分搅拌(摇匀)，待用。2．1．2显色剂。用刻度吸管吸5．2 mL缓冲液注入显色剂瓶中，盖上盖摇匀，置于0—5℃环境中备用，切勿冷冻。2．1．3底物。用刻度吸管吸5．2 mL蒸馏水注入底物干粉瓶中，盖上盖摇匀，置于叽5 cc环境中备用。BR2．2样液制备BR取干净的蔬菜，用天平准确称取2 g，叶菜取叶片部分，果菜横截削下一片，叶片、瓜肉等剪成I cm2，置于100 mL小烧杯内；用吸管吸10 mL缓冲液注入小烧杯中，振荡提取2 min左右；提取结束后静置2—3 min，取上层清液作为样液。2．3仪器操作与样品测定2．3．1仪器预热。接通电源，仪器自检，自检结束后待机预热10 min．仪器工作稳定后进行测量13-71。2．3．2对照测定。向检测板最左排比色孔中用专用的移液枪分别加10卜L酶试剂，再用250斗L移液枪吸取250斗L缓冲液于比色孔，按上下键选择“启动振板”菜单后按“确认”键启动振板10 S，振板结束后。让酶试剂和缓冲液混合液静置反应10 min，用专用的移液枪向比色孔分别加入lO斗L显色剂和10斗L底物，立即将检测板放入托盘，按“对照”键测量(反应时间设为l min)。测试结束，按“确认”键显示对照吸光度变化值。待空白对照值的吸光度变化值在0．15加．30，才可测定样品。否则要重新做空白测定。测量结束后仪器自动保存当前的对照值，下一次测量样品时就可以。2．3．3样品测定。若已完成各通道的对照测试，将检测板上所有比色孔作为样品测量。用不同移液枪分别给比色孔加酶液10“L／孔，加注样品液250斗／孔，显色剂lO斗L／孔。操作步骤同对照测试，最后按“样品”键测量，测试结束后，显示当前测量的样品抑制率结果和吸光度变化值。可根据需要打印被测样品抑制率。2．3．4测试结果的判定。测定结果以抑制率表示。根据GB／T5009．199—2003判定要求，当样品对酶的抑制率≥50％时，表示蔬菜中有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需重复测2次以上。3、农残仪注意事项：定期校正调试、科学使用移液枪。选用250斗L和10斗L可调移液枪，将枪嘴先用清水冲洗再用纯净水冲洗，在电子天平上进行吸液量校正。移液器使用时，必须遵循器具专用原则：吸取酶、显色剂、底物的移液器贴上专用标签，移取试剂时一一对应使用。检测室温度要控制在20—25℃，否则会影响酶的活性，影响结果删。若完成对照测量后，仪器关机重启，则需重新测量对照。进行对照测量时，1 min后对照吸光度变化值应在0．15以上，否则该酶试剂不能继续使用。(3)样液制备过程中，浸提要充分，缩短时间对结果影响较大。酶试剂和样品液或缓冲液的混合液静置反应时间为10 rain，反应时间不同，结果不同。试剂从冰箱取出，先恢复至室温，摇匀后再使用。酶、显色剂和底物不能漏加或多加，否则对结果影响大。试剂使用时，必须遵循只出不进原则：从酶、显色剂、底物试剂瓶中移取出的试剂．不得返回原试剂瓶中，以免污染原试剂151。若被测比色杯中有气泡产生。应排除。以免影响测量结果。(4)测量结果抑制率A％为“一一”，表示测量结果无效。可能由以下几个原因造成：试剂从冰箱取出后，未恢复到室温进行对照测试；对照测试时间与样品测试时间相隔太久。导致光照与样品测试温度条件相差较大；被测样品色素干扰较严重；反应试剂取用量是否准确。另外，其他非测试孔空白的孔位可能也会出现“～一”㈣。仪器操作时，注意托盘上的孔位不能有头发、棉丝等其他异物，如有污物或液体可用过滤纸擦干净，以免影响光路测量。应做好抽样单、检测结果等原始记录的整理并保存好。(5)抑制率≥50％的样品，至少要重复检测2次．才能确定此样品是否合格。葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假磷类农药的样品5个，检出率为6．3％。检出农药为乙酰甲胺磷、毒死蜱、三唑磷、氧化乐果。2．4有机氯类农药残留检测结果由表5可以看出，在被检测的80个样品中，检出有机氟类农药的样品3个，检出率为3．8％。检出