实验一、二、三、四.docVIP

实验一 中药制剂的定性鉴别 实验目的： 通过对加味香连丸的薄层定性检识，掌握中药制剂薄层鉴别方法和原理。 实验原理： 利用对照品、对照药材作为对照，对中药制剂进行TLC检识，以鉴别中药制剂的真伪。 3、仪器与药品： 1）千分之一天平 2）恒温水浴 3）层析缸 4）三用紫外分析仪 5）喷雾瓶 6）吹风机 7）加味香连丸样品 8）盐酸小檗碱对照品、黄连、木香对照药材 9）试剂均为AR级 4、实验步骤： 1）取本品60mg，研细，加乙醇5m l，置水浴中加热回流15分钟，滤过，滤液补加乙醇使成5ml，作为供试品溶液。另取黄连对照药材50mg，同法制成对照药材溶液。再取盐酸小檗碱对照品，加乙醇制成每1ml含0.04mg的溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各2微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯：氯仿：甲醇：氨水：二乙胺（8：2：2：1：0.5）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的黄色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的一个黄色荧光斑点。 2）取本品0.5g，研细，加乙醚5ml，放置2小时，时时振摇，滤过，滤液挥去乙醚，残渣加醋酸乙酯0.5ml使溶解，作为供试品溶液。另取木香对照药材0.2g，加乙醚5ml，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2微升，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷：丙酮（10：3）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105℃烘约5分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的紫红色至蓝紫色斑点。 4、实验结果 如实记录,画出薄层板(黄连及木香) 5、思考题： 1）定性鉴别需配置哪几种溶液。为什么？ 2）定性鉴别对量有哪些要求？ 香草醛 分析纯 50g 天津市轩昂科工贸有限公司 实验二 紫外分光光度法测定复方中黄连生物碱的含量 1、实验目的： 1）了解紫外分光光度法测定复方中黄连生物碱的方法。 2）掌握用柱层析净化提取物的方法 2、实验原理： 盐酸小檗碱对波长为220nm,290nm,350nm的紫外光均有吸收，本实验选择了λ=350nm的紫外光进行，根据此波长所测得的吸光度，可计算出中成药中原小檗碱型生物碱的含量，从而控制此中成药的有效成分含量。采用标准对照法定量。本实验采用Al2O3柱层析净化方法除去杂质。 3、仪器与药品： 1）紫外分光光度计 2）小层析柱：高13cm,内径8mm，2个 3）中性Al2O3(150—200目) 4）样品：加味香连丸 5）标准品：盐酸小檗碱 4、实验步骤： 1）含量测定： A、样品溶液配制： 取加味香连丸0.5g，研成细粉，精密称取0.1g(实验中称取多少写多少)，置60ml索氏提取器中加95%乙醇40ml连续回流提取生物碱至无色。将提取液浓缩至20ml，定量转移到25ml容量瓶中，用95%乙醇至刻度. 精密吸取样品液1.0ml通过Al2O3柱,用95%EtOH至洗脱完全，收集洗脱液于10ml容量瓶中，连续加95%乙醇至刻度，于λmax350nm处测定吸收度。 B、对照品溶液配制 用95%乙醇溶液，配制对照品溶液浓度为0.006mg/ml。 C、含量测定 应用外标一点法测定加味香连丸中总生物碱的含量。 4、实验结果 100g加味香连丸中含有盐酸小檗碱多少克? 5、思考题： 1）如何判断生物碱已被提取完全？ 2）以测定小檗碱为例，除此方法外还有什么测定复方中黄连生物碱的方法？ 3）本实验中测定样品紫外吸收度时，以什么作为空白对照液？为什么？ 实验三 气相色谱法测定合成冰片的含量 一、目的要求 1、掌握气相色谱法测定中药制剂中成分含量的方法和原理。 2、熟悉气相色谱仪进行含量测定的操作过程。 二、基本原理 冰片为龙脑和异龙脑的混合物，具挥发性。因此本实验采用GC法，对合成冰片所含龙脑进行测定，并用内标法计算含量。 三、仪器与试药 1、安捷伦-6820气相色谱仪(FID)、微量进样器。 2、水杨酸甲酯（内标）、醋酸乙酯(AR)。 3、龙脑对照品(中国药品生物制品检定所)。 4、合成冰片(市售品)。 四、操作步骤 1、色谱条件 采用SPB-5 毛细管色谱柱（弱极性），柱长30m，内径0.32mm，液膜厚度0.25μm，分流进样1μL（分流比1:20）；柱温：初始温度100℃，保持1min，以8℃ / min升至180℃，保持1min；后进样口温度为220℃；前检测器温度为300℃；载气为N2，柱前压100kPa左右；H2 50kPa；空气50kPa；FID检测器。理论塔板