实验三蛋白质的盐析分离和凝胶层.pptVIP

生物化学实验Biochemical Experiment 实验成绩评分方法 实验预习情况（10%） 实验操作情况（30%） 实验报告情况（30%） 实验考试成绩（20%） 实验素质（遵守实验室规则和道德行为）（10%） 本学期实验课安排 有关网址和参考书目 /molebio/biochem_books.htm /biochemistry/bioc800/biocindx.htm /~cmg/ / 赵永芳. 生物化学技术原理及应用.北京. 科学出版社.2002 沈同 王镜岩.生物化学.高等教育出版社.2002 ２、蛋白质的盐析分离和凝胶层析脱盐 蛋白质的盐析分级分离 SephadexG-25脱盐 盐离子的跟踪检测 ＵＶ检测蛋白质 蛋白质提取、分离、纯化及鉴定技术 材料（取材一定要新鲜，在低温下操作） 破细胞（匀浆器，研钵，超声波，反复冻融，化学方法，酶解等） 蛋白质提取（根据物质的性质，水、盐溶液、稀酸、稀碱、有机溶剂） 蛋白质分级分离（盐析分级分离、有机溶剂分级分离、等电点分离） 进一步纯化（透析、柱层析：分子筛、离子交换、亲和层析、HPLC） 鉴定（电泳：薄层电泳（纸，NC膜）、凝胶电泳（PAG，琼脂，淀粉）；结构分析；活性分析；呈色反应） 含量测定（fonlin酚法、考马斯亮蓝G250法）