2015-2016高中生物专题21微生物的实验室培养新人教版选修1选编.ppt

1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤如下： 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基及微生物纯化 2．纯化物接种的方法 微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，目的都是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，并在培养基表面形成单个细胞繁殖而成的子细胞群体——菌落。 (1)平板划线法：①通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线培养后，可以分离到菌落。 ②第一次划线及每次划线之前都需灼烧接种环灭菌，划线操作结束仍需灼烧接种环。 ③灼烧接种环之后，要等其冷却后才能伸入菌液，以免温度太高杀死菌种。 ④划线时最后一区域不要与第一区域相连。 ⑤划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破。 具体如下图(结合课本) (2)稀释涂布平板法：①将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。随后挑取单菌落，或重复以上操作数次，便可进行纯培养。 ②稀释操作时：每支试管及其中9mL水、移液管均需灭菌操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2cm处。移液后用手指轻压上端的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。 ③涂布平板时：稀释涂布平板的操作比较复杂，且各个细节均需保证“无菌”，应特别注意： 酒精灯与培养皿的距离要合适；吸管头不要接触任何其他物体；吸管要在酒精灯火焰周围使用。 具体如下图(结合课本) 3．接种成功的标准 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，实验失败，需要分析原因，再次接种。 牛肉膏蛋白胨培养基中加入琼脂这一理想的凝固剂，对这一说法不正确的是(　　) A．不被所培养的微生物分解利用，对所培养的微生物无毒害作用 B．在微生物生长温度范围内保持固体状态 C．琼脂凝固点低，利于微生物的生长 D．凝固剂在灭菌过程中不会被破坏，透明度好，凝固力强 [解析]　理想的凝固剂应具备以下条件：不被所培养的微生物分解利用，在微生物生长的温度范围内保持固体状态，凝固剂凝固点不能太低，否则不利于微生物的生长，如琼脂凝固点为40℃，对所培养的微生物无毒害作用，并且在灭菌时不会被破坏，透明度好，凝固力强，配制方便，价格低廉。常用的凝固剂有琼脂、明胶。 [答案]　C 菌种鉴定的重要依据是(　　) A．细菌的大小、形状和颜色 B．菌落的大小、形状、颜色 C．有无鞭毛 D．培养基的不同 [解析]　不同种类的细菌所形成的菌落在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定特征，所以，每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。单个的细菌用肉眼是看不见的，故细菌的个体特征不能作菌种鉴定的依据。 [答案]　B 有关平板划线法接种微生物的操作的叙述，不正确的是(　　) A．第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养基 B．每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 C．在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来自菌液 D．划线结束后，灼烧接种环，能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 [解析]　平板划线操作中，接种环沾取菌液前灼烧的目的，是避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；以后每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线后残留的菌种；划线结束仍需灼烧接种环，是为了能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，不是菌液。 [答案]　C 下列生物与灭菌无关的是(　　) A．接种前用火焰灼烧接种环 B．接种前用酒精擦拭双手 C．将平板倒置，放入培养箱中培养 D．接种在酒精灯的火焰旁完成 [答案]　C [解析]　接种用具、器皿、空气中都充满了微生物，都有污染的可能，必须严格地消毒灭菌。A、B、D都是实验操作过程中灭菌或防止杂菌污染的措施。将平板倒置，放入培养箱中培养与灭菌无关。 下列关于平菇培养的操作程序，正确的是(　　) A．配制牛肉膏蛋白胨培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养 B．配制牛肉膏蛋白胨培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养 C．配制棉子壳培养基，接种，高压蒸汽灭菌，培养 D．配制棉子壳培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养 [答案]　D [解析]　平菇的代谢类型属于异养型，需要提供现成的有机物才能成长。在题目给出的选项中，B选项是实验中培养细菌等的方法，D选项则是人们常用的培养平菇的方法，为了避免杂菌污染，应在接种前先进行灭菌处理。 下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为1,2,