2017整理基因工程程序课时1.pptVIP

* 一、基因工程的基本操作程序 1．目的基因的获取。 2．______________的构建。 3．将目的基因导入_________。 4．目的基因的检测与鉴定。 基因表达载体 受体细胞 一、为什么要有“目的基因的获取”这一步？ 二、为什么要有“表达载体的构建”这一步？ 有了目的基因，我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性 单独的DNA片段──目的基因是不能稳定遗传的。构建表达载体的目的是为了使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使目的基因能表达和发挥作用。 三、为什么要有“目的基因导入受体细胞”这一步？ 四、为什么要有“目的基因的检测与鉴定”这一步？ 含有目的基因的表达载体只有进入受体细胞，并且维持稳定和表达，才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化 因为目的基因是否真正插入受体细胞的DNA中，是否能够在受体细胞中稳定遗传和正确表达，只有通过检测、鉴定才能得知。 2.基因文库的构建方法 ①鸟枪法： 供体细胞中的DNA 许多DNA片段 运载体 限制酶 与载体连接 载入 受体细胞 产生特定性状 导入 外源DNA扩增 目的基因 分离 (直接分离法) (一)从基因文库中获取目的基因 ②反转录法： 以目的基因转录成的信使RNA为模板，反转录成互补的单链DNA，然后在酶的作用下合成双链DNA，从而获得所需的基因。 目的基因的m