丙二醛含量测件.pptVIP

植物组织中丙二醛含量 的测定小组成员：江容宇 陈玲 许 丽娟 王龙凤 一 原 理 植物器官在逆境条件下或衰老时, 往往发生膜脂过氧化作用,丙二醛(MDA)是其中产物之一, 通常将其作为脂质过氧化指标, 用于表示细胞膜脂过氧化程度和植物对逆境条件反应的强弱。 二 材料、仪器设备及试剂 (一)材料 植物叶片(经逆境条件处理) (二)仪器设备 研钵, 试管, 移液管, 恒温水浴锅, 离心机,分光光度计 (三) 试剂 10 % 三氯乙酸 (TCA) 0.6% 硫代巴比妥酸 (TBA) 材料 正常生长的以及经逆境处理的西红柿植物的叶片。 试剂 5 %三氯醋酸溶解定容 ０.６７％（Ｗ／Ｖ）硫代巴比妥酸（ＴＢＡ） １０％的ＴＣＡ配制 仪器设备 研体 剪刀分光光度计； 分光光度计 恒温水浴； 试管：20 mL×4 离心机。 方法与步骤 新鲜叶片，去污，剪碎，混匀 称三份，0.5g左右 分别置于三只研体中，加5%TCA研磨 所得匀浆在3000r/min下离心１０ｍｉｎ 取上层清液２ｍｌ，加０,６７％ＴＢＡ２ｍｌ，混匀在１００度的水浴上煮沸３０ｍｉｎ，冷却后再离心一次 分别测定上层清液在４５０ｎｍ，５３２ｎｍ和６００ｎｍ处的吸光值，并按公式算出ＭＤＡ浓度 (3) 计算 按公式计算MDA的含量(μmol/g): MDA的浓度(μmol/L) ＝６.４５（Ａ５３２－Ａ６００）－０．５６Ａ４５０ 　　　　　　　　　　　 　　　　Ａ４５０代表４５０ｎｍ波长下的吸光值 　　　Ａ５３２代表５３２ｎｍ波长下的吸光值 　　　Ａ６００代表６００ｎｍ波长下的吸光值 　　 　 四 注意事项 取上清液时要小心，不要将沉淀取出 使用离心机时, 一定要注意平衡. 返回 思考题 　不同植物在同一逆境下，丙二醛含量变化不同，说明了什么？ 植物器官衰老或在逆境下遭受伤害，往往发生膜脂过氧化作用，丙二醛（MDA）是膜脂过氧化的最终产物，其含量可以反映植物遭受逆境伤害的程度。MDA从膜上产生的位置释放出来后，可以与蛋白质、核酸反应，从而丧失功能，还可使纤维素分子间的桥键松弛，或抑制蛋白质的合成。不同植物体内，各个反应进行的程度不同，因而最终的丙二醛含量会有所不同；这与植物的耐受程度也是有关系的。 丙二醛在植物中含量是不是越少越好？ 丙二醛含量高,说明植物细胞膜质过氧化程度高,细胞膜受到的伤害严重，同时也会告诉机体需要进行更激烈的胁迫应答反应，保护机体!自然状态下，物极必反！ * * * * ？ 我会 想一想