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第八章 蛋白质分选与膜泡运输 Chapter 8 Protein Sorting and Vesicular Transport Protein Sorting 1 信号假说 信号肽（Signal peptide）：位于蛋白质的N端，16-26个氨基酸残基组成，包括疏水核心区、信号肽的N端和C端。没有蛋白专一性。 信号识别颗粒(SRP)： 是一种核糖核蛋白复合体，存在于细胞质基质中，可与信号肽和信号识别颗粒受体结合。由α和β亚基组成， α亚基与GTP结合会增加SRP+新生多肽+ER+DP的结合牢固度 停泊蛋白(DP)：SRP的受体,结合在内质网膜上。 跨膜蛋白的形成 内在停止转移锚定序列（STA）和内在信号锚定序列（SA）：一段带20-25个疏水性氨基酸残基形成的跨膜α螺旋。 多肽内部存在停止转移锚定序列，膜融合蛋白。 多肽内部存在多个停止转移锚定序列，多次跨膜蛋白。 2　蛋白质分选和运输的基本原理 蛋白质分选的运输方式： 2.3　蛋白质分选的信号机制 2.3.3.1　线粒体蛋白质的转运 2.3.3.2　叶绿体蛋白质的转运 2.4　Vesicular transport 5.3.1　Types of Coated Vesicles，and its Assembly 4　Mechanism of Targeting fusion 5. 　Assembly of Cell structure systems Bip在ER蛋白的转移和装配中的作用 研究发现进入内质网腔中的蛋白质片段很快被一些称为Bip的蛋白结合。 Bip蛋白是重链结合蛋白 (heavy-chain binding protein) 的简称,因为它能够同IgG抗体的重链结合。Bip是一类分子伴侣,属于Hsp70家族, Bip同进入内质网的未折叠蛋白质的疏水氨基酸结合，防止多肽链不正确地折叠和聚合 Bip在ER腔中的作用Bip与转运到ER中蛋白的疏水部分结合,防止蛋白质的变性或降解,使其正确地折叠。结合有蛋白质的Bip在ATP水解后释放被结合的蛋白,如果释放的蛋白仍然是未折叠的,Bip将重新与这种蛋白结合。Bip还可帮助两种不同的蛋白共同装配。 （3） Clathrin Coated Vesicles 》相关运输途径：质膜→内体（选择性胞吞作用），高尔基体→内体，高尔基体→溶酶体、植物液泡。 》结构：由3个重链和3个轻链组成，形成一个具有3个曲臂的形状。许多网格蛋白的曲臂部分交织在一起，形成具有5边形网孔的笼子。 86 》衔接蛋白，又称接合素蛋白(adaptin /AP)：介于网格蛋白与配体受体复合物之间，起连接作用。 87 目前已知有三种衔接蛋白:AP1、AP2和AP3。 AP1: 衔接蛋白AP1参与TGN→内体、质膜的网格蛋白有被小泡的装配。 AP2: 衔接蛋白AP2是由α衔接蛋白(α链)和β衔接蛋白(β链)两种衔接蛋白组成的异二聚体。参与质膜→胞内体（内吞作用）的网格蛋白有被小泡的装配。 AP3:参与高尔基体→溶酶体，植物液泡的网格蛋白有被小泡的装配。 88 》 Dynamin ：小泡最后与膜的脱离还需要Dynamin 。当网格蛋白衣被小泡形成时。作用是在被膜小窝的颈部聚合,通过水解GTP调节自己收缩, 最后将小泡与质膜割开。 Dynamin,是一种单体GTP结合蛋白（有别于三聚体GTP结合蛋白，即G蛋白），也是网格蛋白有被小泡形成的装配反应因子(Assembly Reaction Factor,ARF) 89 网格蛋白有被小泡的装配： 高尔基体TGN是网格蛋白包被小泡形成的发源地. 网格蛋白小泡的形成过程 90 (1)Targeting：SNARE hypothesis James Rothman和他的同事根据对动物细胞融合研究的发现, 提出有关小泡寻靶的SNARE假说(SNARE hypothesis)。 96 》SNARE hypothesis: 由于NSF/ SNAPs能够介导不同类型小泡的融合,说明它没有特异性。据此Rothman提出:膜融合的特异性是由另外的膜蛋白提供的，把这种蛋白称为SNAP受体蛋白(soluble NSF attachment protein receptor，SNAREs)，这种蛋白可以作为膜融合时SNAPs的附着点。 》NSF和SNAPs：他们发现动物细胞融合需要一种可溶性的细胞质蛋白,叫做N-乙基顺丁烯二酰亚胺敏感的融合蛋白(N-ethylmaleimide-sensitive fusion protein,NSF)以及其它几种可溶性的NSF附着蛋白(soluble NSF attachment protein,SNAPs)。NSF是一种四聚体，四个亚基都相同。SNAPs 有α-、β-和γ- SNAPs等。