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学 术 论 文 题 目：抗体酶的研究与应用进展 类 别：综述型 学 院：生物科学与工程学院 专业班级：生物工程1102班 学生姓名：闫超杰 （1112024045）刘青（1112024049） 陈建 （1112024053）周游（1112024050） 杨柚柳椰（1112024047）牛犇（1112024048） 2012年4月28号 抗体酶的制备与应用研究进展 闫超杰，刘青，陈建，周游，杨柚柳椰，牛犇 （陕西理工学院 生物科学与工程学院 生物工程专业 陕西 汉中 723000） ——指导老师 陈琛 内容摘要：抗体酶是具有催化性质的抗体，它同时具备抗体和酶的特征，可催化多种化学反应，如酰基转移、酯水解、酰胺水解、重排反应、光诱导反应、氧化还原分应、金属螯合反应等。用人工方法合成的抗体酶，可作为研究酶作用机理的有力工具，用于催化大量天然酶不能催化的立体专一性反应，更为开发具有高度选择性的药物提供了新途径。本文对抗体酶的设计策略、制备方法、催化反应类型、及应用前景作了综述。 关 键 词：抗体酶,过渡态类似物,应用 抗体酶（Abzyme）是一种新型人工酶制剂，它是依据对酶分子催化反应机制的理解，结合免疫球蛋白的分子识别特性，应用免疫学、细胞生物学、化学、分子生物学等技术制备的具有高度底物专一性及特殊催化活力的新型催化抗体并且具有典型的酶反应特性：与配体（底物）结合的专一性，包括立体专一性并且其催化反应的专一性可以达到甚至超过天然酶的专一性；具有高效催化性，一般抗体酶催化反应速率比非催化反应快104～108倍，有的反应速度已接近于天然酶促反应速度；抗体酶还具有与天然酶相近的米氏方程动力学及pH依赖性等。如今由于抗体酶的多样性、特异性和稳定性，已经形成了生物界中一个崭新的超分子体系，它把免疫学、酶学理论的发展和抗体在医药、工业等领域的应用推向一个新水平。近些年来，其研究的技术日益先进，应用范围不断拓宽，越来越受科学家们的关注。 1 抗体酶的制备 1.1 抗体酶的设计策略 目前大多数抗体酶是通过以设计合理的，将反应过渡态类似的小分子作为半抗原，继而让动物免疫系统产生针对半抗原的抗体来获得的。最早的设计策略涉及运用过渡态类似物制备抗体酶，随后，酶催化的化学本质如邻近反应、酸碱催化、共价催化等也用于抗体酶的设计。目前，抗体酶的设计策略有：稳定带电过渡态、诱导和转换设计、抗体作为熵阱效应、反应免疫、引入催化基因团。 1.1.1稳定带电过渡态 以过渡态类似物作为半抗原，利用免疫系统的分子多样性，则有可能诱导产生对过渡态类似物特异性结合的抗体。这种抗体含有同底物反应过渡态互补的结合空腔，因而和酶一样，也能发生催化反应。 1.1.2诱导和转换设计 诱导和转换设计的原理是利用半抗原和抗体间的电荷互补性，即以带电基团为“诱饵”，在抗体结合部位诱导带相反电荷的功能团，当底物不存在“诱饵”的电荷时，被诱导的功能团将以一般酸碱或亲核催化对底物其它基团发生作用。 1.1.3抗体作为熵阱效应 除稳定带电过渡态外，熵阱效应对催化反应也有决定性作用。熵阱是指催化剂以有利的定位方向结合底物的能力，因此限制了底物平动和旋转自由度，结果导致活性部位中底物的有效浓度增加。 1.1.4反应免疫 通过使用一个能和抗体发生反应的化合物作为免疫原，促使抗体结合部位在免疫过程中发生特定的化学反应，诱导过程中抗体和抗原发生共价相互作用，产生的抗体同样也可能催化类似的反应。 1.1.5引入催化基团 在抗体酶的结合部位引入催化基团，如果引入的催化基团与底物结合部位取向正确，空间排布恰到好处，则应产生高活力抗体酶。引入催化基团的方法有：(利用部位选择性试剂，以类似亲和标记的方式定向的将催化基团引入抗体；(用蛋白质工程技术引入带催化基团的氨基酸残基。 1.2 抗体酶的制备方法 制备抗体酶的方法有很多，如诱导法、拷贝法、化学修饰法、引入辅助分子法、天然来源抗体酶、基因工程法等。酶的基本概念如张力 、邻近效应、酸碱催化和共价催化等被用于抗体酶的设计。 1.2.1诱导法 即单克隆技术也称为杂交瘤技术或体内免疫法来制备。因为过渡态极不稳定，是一种稍纵即逝的结构，其寿命约为 s,因此不可能用它对动物进行免疫。用一个或其它几个原子或原子团取代过渡态的特定原子或原子团获得在形状、电性、酸碱性等诸方面与过渡态相似的稳定物质，即过渡态相似物，然后用它作为半抗原和载体蛋白一起对动物进行免疫，最后取免疫动物的脾细胞与骨髓肿瘤细胞进行杂交，其杂交细胞就会源源不