肉制品中亚硝酸盐的测定解析.pptVIP

肉制品中亚硝酸盐含量的测定 1331214 张瀚文 一、实验原理： 亚硝酸盐在盐酸溶液中，与芳香族胺，如对氨基苯磺酸 (H2N—C6H4一SO3H)发生重氮化反应产生重氮盐，此重氮盐与偶合试剂，盐酸奈乙二胺生成紫红色偶氮染料。此染料的颜色随亚硝酸盐的浓度增长而加深，或称与样品中亚硝酸盐的浓度成正比。因此，可采用分光光度闭塞测定。 二、试剂与仪器 1、 饱和硼砂溶液：称取5克硼酸钠(Na2B07·10H20)，溶于100毫升热水中，冷却后备用。 2、蛋白质沉淀剂：硫酸锌溶液，150g硫酸锌溶于500mL重蒸馏水中。 3、 发色剂1：0.4％对氨基苯磺酸溶液：称取0.4克对氨基苯磺酸，溶于100毫升20％的盐酸中，避光保存。 3、?发色剂2：0.2％盐酸萘乙二胺溶液：称取0.2克盐酸萘乙二胺，溶于100毫升水中，避光保存。 5、亚硝酸钠标准溶液：精密称取0.1000克亚硝酸钠（优级纯），以重蒸馏水定容到500mL，从中抽取25mL，以重蒸馏水定容到100mL备用，亚硝酸盐浓度为5ug/L。 材料：市售红肠或腌肉 所需仪器 分析天平 、水浴锅、比色管、比色皿、722分光光度计 1.亚硝酸钠标准曲线的绘制 三、操作步骤： 移取标准液至比色管（0.0mL 0.2mL 0.4mL 0.6mL 0.8mL 1.0mL 六支一组） 加水稀释至10mL 加入2mL发色剂1（对氨基苯磺酸溶液） 摇匀，静置3min 加入2mL发色剂2（盐酸萘乙二胺） 摇匀呈紫红色 用水稀释至25mL标线，摇匀，待测 静置 10min 用分光光度计540nm波长处测定吸光度 用10mm比色皿测得各亚硝酸钠含量，作出曲线 两者 线性 关系 2、样品中亚硝酸盐的提取 ? 2g切碎红肠于50mL烧杯 加入饱和硼砂溶液6.5mL 玻棒 搅拌 每次20mL的70℃左右的水倒入烧杯 转入100mL容量瓶中 洗3、4次 置沸水中水浴，从水沸时计时15min 取出 一边转动一边滴加1.5mL硫酸锌溶液，使蛋白质沉淀 冷却后定容 摇匀放置后，撇去上层脂肪 清液用滤纸过滤，必须清澈 3.样品中亚硝酸盐的测定 取10mL的滤液于25mL的比色管中 加入2mL发色剂1（对氨基苯磺酸溶液） 摇匀，静置3min 加入2mL发色剂2（盐酸萘乙二胺） 用水稀释至25mL标线，摇匀，待测 静置 10min 重复操作测定吸光度并记录，对比标准曲线图，并计算亚硝酸亚的含量 绘出标准曲线图 四、计算 计算样品中亚硝酸盐的含量 ??