第四章基因文库的建立.ppt

建立基因组文库的载体 A 鸟枪法 转化受体细胞 如果转化子采用菌落原位杂交法或限制性酶切图谱法筛选，则选择大肠杆菌作为受体细胞；如果转化子采用基因产物功能检测法筛选，则选择能使目的基因表达的受体细胞 筛选含有目的基因的目的重组子 菌落原位杂交法、基因产物功能检测法（筛选模型的建立） 同聚物加尾连接 cDNA第二链的合成 煮沸 NaOH 自身引导法：获得的双链cDNA 5’端会有几对碱基缺失 AAAAAAAAAAAAAA 5‘ppp’5 G G AAAAAAAAAAAAAAOH3’ TTTTTTTTTTTTTTp 5’ TTTTTTTTTTTTTTp5’ TTTTTTTTTTTTTTp5’ AAAAAAAAAAAAAAOH3’ TTTTTTTTTTTTTT OH 3’ Klenow dNTPs S1 * * 第四章?? ?? 基因文库的建立 ? 基因文库(gene library) 基因组文库(genomic library) cDNA文库(cDNA library) 第一节 基因组文库的构建 定义： 含有某种生物全部遗传信息的重组DNA分子的克隆总和。 一. 基因组文库的规模 N—基因组文库克隆总数