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花青素提取法总结
玉米籽粒花青素提取和分析方法 花青素是植物中的主要呈色物质,属于类黄酮化合物 自然状态下很少以游离态存在,常与一个或多个多糖通过糖苷键形成糖苷 已知有20多种花青素,植物中常见的有六种:天竺葵色素、矢车菊色素、飞燕草色素、芍药色素、牵牛花色素、锦葵色素(其最大可见光吸收波长分别为494、506、508、506、508和510 nm) 花青素的生理功能 消除自由基、抗氧化 紫玉米花色苷具有很高的抗氧化活性和抗 菌活性,甚至高于蓝莓的抗氧化活性。 抗诱变、肿瘤、过敏 抑制食品诱变剂,对结肠癌细胞有抑制作用 降血脂 花青素的结构特点 花青素的稳定性影响因素 结构 ①C3羟基可使分子变得不稳定,C5上有羟基或C4发生取代都可使颜色趋于稳定 ②糖苷的形成也影响花色苷的稳定性 ③花色苷的酰基化显著增加其在微酸性至中性介质中的稳定性 温度 PH 温度 当花色苷溶液加热时,平衡向着无色的查耳酮(C) 的方向进行,同时引起有色型化合物(AH+ + A) 的降低。当冷却和酸化时,醌型碱(A) 和假碱(B) 迅速变成阳离子(AH+ ) 。花色苷在温度小于 60℃的条件下较为稳定,当温度大于 80℃时,温度对花色苷有较明显的降解作用; 光对花色 苷的稳定性影响 很大 辅色剂的影响 花色苷同辅色剂联合形成一种垂直层叠的复合物(Goto 等1979) ,这种层叠过程产生一种疏水力,从而防止亲水核的加合作用和失色。 提取方法:一、萃取 溶剂法 常用的溶剂主要分为3类:水、亲水性有机溶剂和亲脂性有机溶剂。为防止花色苷的降解和提高花色苷的溶出率,常在溶剂中加少量的无机酸或有机酸,使提取液的p H 控制在3.15 以下。 这是目前国内外广泛使用的提取方法,多数选择甲醇、乙醇、丙酮或它们的混合溶剂对材料中的花青素进行溶解过滤,通过酸或碱调节溶液酸碱度萃取滤液中的花青素。 该方法原理简单,对设备要求较低,不足之处是大多数有机溶剂毒副作用大且产物提取率低。 水溶液提取法 该方法一般在常压或高压下用热水浸泡含花青素的原材料,然后用非极性大孔树脂进行吸附;或直接使用脱氧热水提取,再采用超滤或反渗透经浓缩得到粗提物 陆国权等 研究表明,提取脚板薯花青素的最佳方法是:以0.5% 硫酸溶液作浸提剂,并使其pH44.0,在6O℃下加热60 min。 设备简单,无污染,产品无毒但纯度低。 超临界流体萃取法 利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响进行提取。 最大的优点是产品提取率高,可以低温操作,避免了不饱和脂肪酸的氧化分解,溶剂无残留,且作为超临界流体的CO2易得,萃取能耗低。 时海香等人研究了超临界CO2 萃取常山胡柚天然色素的工艺,色素提取率可达96.187 % 提取方法:二、破除细胞壁 发酵提取法 ① 原理是:通过微生物的作用使紫甘薯中的淀粉转化为乙醇,将乙醇分离后,可得到紫甘薯花色苷,原料的利用率大大提高。 ② 其利用微生物破坏细胞壁和细胞膜,促进花色苷的溶出,提高提取率。通过发酵分解色素液中的糖、有机酸和其他杂质,大大降低了色素的纯化难度。 酶法提取 用于花色苷提取的酶主要有纤维素酶和果胶酶,通过酶解使植物细胞壁软化、膨胀及崩溃,从而促进了花色苷的溶出。 王萍等人通过单因素和正交试验,确定了黑加仑果渣花色苷酶法提取的的最佳工艺,黑加仑花色苷提取率的91.109 %, 此法可以大大缩短花色苷提取时间,提高得率。 辅助方法 超声波辅助提取 ① 在超声波声场中,振动负压区由于周围的液体来不及补充,形成无数的微小真空泡,而当正压来到时,微小气泡在压力下突然闭合,液体间猛烈碰撞产生极大的冲击波,压力可高达3 000 MPa ,从而使植物细胞破裂,利于花色苷的溶出。 ② 此法具有提取时间短,设备简单,操作方便等优点,并可有效防止热敏性成分的高温分解。 微波辅助提取 当微波加热时,细胞内极性物质尤其是水分子吸收微波能,产生大量的热量使细胞内温度迅速上升,液态水汽化产生的巨大压力将细胞膜和细胞壁冲破,形成微小的孔洞,使胞外溶剂容易进入细胞内,溶解并释放出胞内物质。 与传统方法相比,微波法具有提取率高、时间短、能耗小等优点,因此微波用于天然素的提取工艺具有广阔的应用前景。 其他辅助方法 高压脉冲电场辅助提取 高压脉冲电场辅助提取法是一种新型非热技术,它具有提取温度低、速率快、时间短、提取率高、产品品质好的特点。 液态静高压法辅助提取 Corrales 等人用液态静高压辅助提取的方法从葡萄皮中提取花色苷,研究所得的最优工艺参数是:100 %乙醇,温度50 ℃,压力600 MPa 。此法与未使用HHP 法相比,产率提高23 %。H HP 具有提取温度低,时间短,不破坏色素结构等优点,但应用于
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