抗原决定簇选择解决方案.pptVIP

线性表位(1inear)：为小的线状肽链序列，约为5～20个氨基酸；构象表位(conformational)：由蛋白折叠而形成的较大的区域。抗原--抗体结合晶体结构研究表明存在两种类型的表位。MHC主要组织相容性复合体 采用化学“切割”法或酶法研究抗原表位过程比较复杂，抗原-抗体结合的条件，酶解的条件，解离后的片段是否能有效分离，解离的完全程度，酶解片段的大小等对结果都会有影响。 噬菌体肽库是噬菌体展示技术的一个非常重要的分支。通过目标受体来筛选与其相互作用的噬菌体肽，经过洗脱、扩增，从而富集到特异性的重组噬菌体，并分析所筛选到的肽的结构和序列，由于噬菌体随机肽库具有容量大、体积小、筛选简便、制备成本低、可多次扩增等突出优点. 表位作图方法也可用在其他方面的研究，如蛋白质功能活性的定位，以及特殊标志的结合区分析。 对常见的20种氨基酸进行打分，每一种方案打分不一样，然后对提交的序列进行打分得到一个权衡值。 不同的氨基酸都有相对应的Score,每一种方案中的Score值不一样，得到的结果也不一致。 I类分子由非共价键连接的两条肽链组成的糖蛋白；其中一条称为重链或α链，另一条为轻链或称为β2微球蛋白（β2m）。II类分子的α1和β1功能区共同形成一个与Ⅰ类分子相似的槽型结构的多肽结合区 抗原决定簇的确立与选择（一） 报告内容 概念 1 研究意义 2 研究方法 3 抗原表位--定义 抗原表位，又称抗原决定簇(antigenic determinant，AD)，是指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团，因而表位代表了抗原分子上的一个免疫活性区，负责与抗体分子或免疫细胞表面的抗原受体结合。严格说来，抗体的特异性是针对表位而不是针对完整的抗原分子的。 抗原通过抗原表位与相应的淋巴细胞表面的抗原受体结合，从而激活淋巴细胞，引起免疫应答；抗原也借表位与相应抗体或致敏淋巴细胞发生特异性结合而发挥免疫效应。 抗原表位的性质、数目和空间构型决定抗原的特异性。 抗原分子以其B细胞表位与抗体分子的抗原结合部位发生互补性结合 A.抗原--抗体复合物的立体构象； B.采用电脑技术将抗原和抗体分子分开，可见抗原和抗体分子的相互作用仅发生在抗原分子的B细胞表位和抗体分子的抗原结合部位之间，两者呈现结构互补。 C.抗体的互补决定区与抗原表位结合示意图 C 一般情况下，一个多肽表位含5~6个氨基酸残基；一个多糖表位含5~7个单糖；一个核酸半抗原的表位含6~8个核苷酸。 抗原表位的大小与相应抗体的抗原结合部位相适合。 一个抗原表位的特异性由组成它的所有残基共同决定，但其中有些残基在与抗体结合时比其它残基起更大作用，这些残基被称为免疫显性基团。 抗原表位--分类 覆盖型和非覆盖型表位 某些抗原分子表面，不同表位之间相对分离，各自结合特异性抗体，互不影响，这类表位被称为非覆盖型表位。 若某一表位与相应抗体结合会影响另一表位与抗体的结合，此类表位称为覆盖型表位。 功能性和隐蔽表位 　 位于抗原分子表面的表位易被相应淋巴细胞所识别，即具有易接近性，可直接启动免疫应答，故称为功能性表位。 存在于抗原分子内部的表位无直接触发免疫应答的功能，称为隐蔽表位。若通过理化因素处理抗原，使其结构发生改变，内部的隐蔽表位被暴露，可能成为新的有功能的表位。 按表位结构不同，分为连续性抗原表位和不连续性抗原表位。 连续性表位又称线性表位，是由肽链上顺序连续的氨基酸组成通常这种结合比较弱，因为小肽并不含完整天然蛋白的构象，在多数情况下这种表位可能只代表了复杂表位的一部分。对其研究依赖于多肽固相化学合成技术。 后者又称构象型抗原表位，是由那些空间邻近但顺序上不连续的氨基酸组成。 分类 按照与抗原受体细胞结合不同，分为B细胞抗原表位和T细胞抗原表位。 分类 特性 T细胞表位 B细胞表位 表位分子 TCR BCR MHC分子 必需 无需 表位性质 主要是线性多肽 天然的多肽、多糖、脂多糖、有机化合物 表位大小 8-12氨基酸(CD8-TC) 12-17氨基酸(CD4-TC) 5-15个氨基酸，5-7个单糖或5-7个核苷酸 表位类型 线性表位 构象、线性表位 表位位置 抗原分子任意部位 抗原分子表面 研究意义 表位是蛋白质抗原性的基础 ，研究蛋白质抗原表位， 对于设计具有免疫原性和中和活性的多肽、新型疫苗分子及新型诊断试剂具有较大意义。 应用：多在诊断与疫苗的研究中,尤其是在制作良好的特异性诊断试剂盒中更为重要。 抗原表位研究方法 通过化学或生物学方法处理抗原分子以