目的菌的获得菌落特征数量统计分析.docxVIP

实验名称：目的菌的获得、菌落特征、数量统计分析姓 名：学 号：系 别：实验日期：同组同学名单：摘要：本实验通过文字资料以及所培养菌落的实物观察，进一步掌握了细菌、放线菌等菌落的特征。实验目的：学习微生物分离纯化方法学习微生物无菌操作技术总结细菌、放线菌、酵母菌和霉菌菌落特征实验材料：已经灭菌的培养基接种环无菌培养皿等 自己涂的平板图片资料实验方法及步骤：一、分离制备浓度为的土壤悬液计算并称量所取土壤，将土壤装入盛有95ml无菌水的锥形瓶中，震荡5~10min，使土壤充分溶解为悬浊液。制备系列土壤悬液的稀释液用无菌移液管吸浓度为的土壤悬浊液0.5ml，放入4.5ml的无菌水中即为浓度是的稀释液，依次操作制备出——浓度的稀释液。制备过程中，移液枪的枪头要用一次换一次。倒平板融化培养基（不要过热），无菌操作下，倒入培养皿内。牛肉膏蛋白胨固体培养基、高氏1号培养基各倒5个平板。涂布法分离各类微生物培养（incubation） 28~30C, 24~48hr二、无菌操作练习 1. 划线法（streak plate）分离纯化微生物使用接种环，从纯化的金黄色葡萄球菌菌落中蘸取少量菌液，分别在牛肉膏蛋白胨培养基、高氏1号培养基、土豆培养基上以之字形划线。 2. 斜面接种练习 3. 穿刺接种 用接种针沾取少量菌种，然后从半固体培养基的中心穿入其底部约1cm处，然后沿原路线抽回接种针。实验结果：土壤中细菌稀释分离培养 所取土样地点：生命科学学院楼前雪松树下；取样质量：1g各培养基高浓度菌落中已经出现大量重叠现象，所以所记数据不具参考性。所记录的低浓度菌落数由于存在误差较大，也可能与实际数量有所出入。在对三种菌的培养中，最终数据只选择了所制备三种浓度梯度培养基中分离效果最好的培养基进行计数，以便尽可能客观地体现菌种数量。菌种种类细菌（牛肉膏蛋白胨培养基）放线菌（高氏1号培养基）霉菌（土豆培养基）浓度（g/ml）菌落数2873估测原土样中细菌含量约为1.4×个/g 放线菌含量约为3.5×个/g霉菌含量约为1.5×个/g对牛肉膏蛋白胨培养基的细菌观察中发现：黄白色的扁圆形菌落是有荚膜类细菌的菌落；有一些产生已经扩散的蓝色和红色色素的细菌，所产生色素为脂溶性色素。菌落多为半透明。对高氏一号培养基的放线菌进行观察后发现白色干燥的圆点状放线菌菌落，质地紧密，不透明。实验结果分析：实验操作中，遇到了如下几个问题。在制作平板培养基时发现，冷凝后的平板培养基盖上有较多雾滴，妨碍视线，不利于划线时的观察。制作时，培养基冷凝过程中可以把数个培养基叠在一起，这样可以使上面的热培养基烘烤下面的培养基盖，从而减少雾滴的产生。放线菌菌落培养中高浓度菌种培养基中放线菌反而不明显，而在中低浓度菌种培养基中，发现了较为明显的放线菌菌落。考虑可能由于所取土样中细菌霉菌数量远多于放线菌引起的资源竞争影响了放线菌生长。在中低浓度的菌种培养基中，发现了较为明显的放线菌。微生物学实验——目的菌的获得、菌落特征、数量统计分析1