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- 2017-02-06 发布于湖北
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营养缺陷型菌株的筛选方法 主讲人:张波 制作:张烨 许洋 材料收集:徐正炀 车通 周浩 什么是营养缺陷型菌株? 经过人工诱变或自然突变失去合成某种营养(氨基酸,维生素,核酸等)的能力,只有在基本培养基中补充所缺乏的营养因子才能生长的野生型菌株。 它是一种生化突变株,它的出现是由基因突变引起的。遗传信息的载体是一系列为酶蛋白编码的核酸系列,如果核酸系列中某碱基发生突变,由该基因所控制的酶合成受阻,该菌株也因此不能合成某种营养因子,使正常代谢失去平衡。 营养缺陷型菌株的分离和筛选 4个步骤: 1、诱变培养 2、淘汰野生型 3、检出营养缺陷型 4、鉴别缺陷种类,确定生长谱 一、诱变培养 营养缺陷型的诱变方法和诱变因子与普通诱变育种基本相同。用于诱发营养缺陷型的诱变剂有亚硝基胍,紫外线,亚硝酸等,其中亚硝基胍的诱发突变率极高,一般可达10%以上,另外,随着诱变剂量的提高突变频率也追加。 二、淘汰野生菌株 在诱变后的存活菌体中营养缺陷型菌株的数量很少,一般仅占存活菌体的百分之几或千分之几,而野生型细胞却大量存在,因而要采取一些措施,尽量淘汰野生型细胞,使缺陷型菌株得以富集,以利于检出。 淘汰野生型菌株的方法有:抗生素法、菌丝过滤法、差别杀菌法和饥饿法等。 1、抗生素法: 细菌用青霉素法:细菌细胞壁的主要成分为肽聚糖,而青霉素能抑制细胞壁肽聚糖链之间的交链,阻止合成完整的细胞
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